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荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)是一种以偶极子-偶极子耦合的形式将供体电子态激发能转移给邻近基态受体分子的光物理过程。FRET发生在两分子间靠得很近的纳米量级的距离之间,并且能量转移效率(E)与距离的6次方成反比,因此有着“分子标尺”之称。最近,有人提出基于三线态荧光相关光谱分析(tsFCS)测量FRET效率的方法。 在FCS测量中,荧光辐射总是伴随着三线态(T)的激发。即便是在适度激光强度辐照于荧光基团也会有大量的三线态激发的产生。电子在单线态-三线态之间的快速跃迁造成的荧光涨落使得荧光自相关曲线在快速相关时间区域有一个抬起。任何荧光基团的三线态激发都是激发强度高度敏感的,而不管激发光强是直接来自光源的激发或是来自荧光共振能量转移的激发。实际上,可以根据在特定激发光强度下的荧光自相关曲线来估算能量转移效率E。 本论文基于最大熵原理并针对受体的tsFCS分析,称为tsFCS-FRET,提出一种复杂FRET系统中的供受体距离分布的方法。一个距离依赖性的受体三线态权值分布函数被引进到固定FRET距离的tsFCS分析中,并且保证三线态权值函数满足香农熵最大化的要求。计算模拟表明,tsFCS-FRET分析的三线态权值分布函数与复杂FRET系统中的预设分布相一致。总之,tsFCS-FRET方法为包含多个成份的复杂FRET系统中提供了一个分析供受体距离分布的强有利工具。