RNA干扰抑制麻疹病毒侵染细胞的研究

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麻疹病毒至今仍然造成全球每年五千万人的感染和发展中国家每年一百万儿童的死亡。目前运用的麻疹病毒疫苗不能很好的控制病毒的感染和传播,急需寻找新的有效方法。人细胞表面的SLAM(signaling lymphocytic activation molecule)分子是2000年鉴定的麻疹病毒的第二受体,也是麻疹病毒的主要受体。在本研究中,我们利用RNAi技术在EB病毒转染的绒猴细胞系B95-8中抑制SLAM的表达从而抑制麻疹病毒的感染。我们以SLAM基因上的三段序列作为靶序列,设计合成了三条siRNA序列,分别克隆到pSilencer 3.0-H1载体上然后分别把构建好的载体转染B95-8细胞。用流式细胞仪、RT-PCR、Western-Blot分别检测SLAM在转录和表达水平上的变化,然后用麻疹病毒疫苗株S191感染B95—8细胞,72小时后观察和收集病毒。经CPE现象和病毒滴度测定发现其中一种siRNA(pH1/SALM-RNAi3)可以有效的降低SLAM的表达从而抑制麻疹病毒疫苗株S191对B95-8细胞的感染。 通过以上实验,我们发现并证明了一种siRNA可以有效的降低SLAM的表达进而抑制麻疹病毒的感染,可能成为一种有效抑制麻疹病毒感染的新方法。
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