黄柏炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)的研究

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黄柏(Cortex Phellodendri)为芸香科(Rutaceae)黄檗属(Phellodendron Rupr.)植物黄皮树(P.chinense Schneid.)和黄檗(P.amarense Rupr.)的干燥树皮,是著名的川产地道药材之一。黄柏炭疽病(Phellodendron Anthracnose)是四川黄柏产区普遍发生的一种病害,病原为炭疽菌属胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。本试验对黄柏炭疽病病原菌的分离与鉴定、生物学特性和室内药剂筛选进行了研究。研究结果如下:1.黄柏炭疽病病原菌的分离与鉴定采用组织分离法,从采集到的具有炭疽病症状的黄柏叶片上分离到黄柏炭疽病的病原菌。将分离到的病原菌进行了传统的形态学鉴定和分子生物学鉴定,根据对病原菌的形态特征和培养性状观察以及rDNA-ITS区段序列分析,将病原菌鉴定为炭疽菌属胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。病原菌分生孢子盘散生或聚生,初埋生,后突破表皮,具刚毛;刚毛暗褐色,有分隔,刚毛大小为2.2-3.2μm×70-112μm;分生孢子梗无色,具分隔;产孢细胞无色,圆柱状,内部芽生瓶体式产孢;分生孢子无色,单胞,短圆柱状,有时含1-2个油球,两端钝圆或一端略尖,分生孢子大小为4-6×12-18.5μm。2.黄柏炭疽病菌的生物学特性研究本文研究了黄柏炭疽病病原菌胶孢炭疽茵菌丝生长、产孢以及孢子萌发的温度、湿度、时间、pH值、光照和营养条件等环境因素的影响,明确了菌丝生长、产孢和孢子萌发的最适条件。研究结果表明:病原菌在10-35℃均能生长,最适温度为30℃;产孢的温度范围为15-30℃,最适温度为25℃。在PDA、10%和20%黄柏叶片煎汁+PDA三种培养基上菌丝生长较快,在高氏一号培养基上生长最慢;在PDA上产孢最好,在查氏培养基上产孢最差。在pH5-11范围内菌丝均能生长和产孢,菌丝生长最适pH5-8;产孢最适pH5-7。碳源利用上,菌丝生长以蔗糖和木糖最好,而产孢以淀粉为佳。氮源利用上,菌丝生长和产孢均以有机氮源蛋白胨为最适氮源;而在铵态氮上生长最差,菌落畸形,无气生菌丝,且不产孢。光照对菌丝生长的影响不大,但对产孢有利。病原菌分生孢子在无菌水中的萌发率很低,加入糖分有利于孢子的萌发,而加入1-2%的寄主叶片煎汁能显著提高孢子的萌发率。在15-35℃范围内分生孢子均能萌发,最适温度范围为25-35℃。在最适条件下,病菌分生孢子4h开始萌发。分生孢子萌发对湿度的要求极高,只有当相对湿度达到100%以上时,分生孢子才开始萌发,在100%+水滴中的萌发率最高。pH4-11范围内孢子均能萌发,pH5-7孢子萌发较好。孢子对光照敏感,全黑暗有利于孢子萌发和芽管及菌丝的伸长。另外,菌丝的致死温度为49℃,分生孢子的致死温度为54℃。3.黄柏炭疽病菌的室内药剂毒力测定采用药皿法和玻片萌发法测定了多菌灵、烯唑醇、三唑酮和抑霉唑四种杀菌剂对黄柏炭疽病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用。结果表明:多菌灵对黄柏炭疽病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用最强,抑霉唑次之,第三为三唑酮,烯唑醇的抑菌效果最差。
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