论文部分内容阅读
【目的】从蛋白和基因水平了解TNF-α(Tumor necrosis factor alpha:TNF-α)在不同时期增生性瘢痕组织中的含量、分布情况及其相关受体TNF-αR1 mRNA在该组织中的表达情况,探讨TNF-α及其相关受体TNF-αR1在增生性瘢痕发生、发展过程中的作用,为增生性瘢痕的基因治疗探索一条有效途径。【方法】主要应用了分子生物学、免疫组织化学和病理学等实验技术进行研究。(1)应用TNF-α、巨噬细胞和T淋巴细胞的单克隆抗体对实验收集的不同时期增生性瘢痕组织(33例)、正常瘢痕(5例)的石蜡切片进行免疫组织化学染色,观察这些组织中细胞因子TNF-α蛋白质的定位及表达变化;(2)利用RT-PCR 技术检测不同时期增生性瘢痕组织中TNF-αmRNA的表达情况,半定量分析TNF-αmRNA表达的动态变化;(3)利用RT-PCR 技术检测1年以上增生性瘢痕组织成纤维细胞中TNF-αR1 mRNA表达情况,与正常瘢痕相比较探讨其临床意义。【结果】(1)在增生性瘢痕组织的不同时期,TNF-α的阳性细胞的百分比呈阶段性递增趋势且差别明显(P<0.01),1~3月TNF-α阳性细胞的百分比最低为4.93%,3~6月TNF-α阳性细胞的百分比为7.57%,6~12月为10.96%,12个月后最高达13.24%。而正常瘢痕TNF-α阳性细胞百分比高达29.84%;(2)在增生性瘢痕组织的不同时期,与TNF-α蛋白质动态变化一致的是:TNF-αmRNA 也存在着类似关系(P<0.01),从而从基因水平证实了TNF-α蛋白质动态表达情况;(3)1年以上的增生<WP=7>性瘢痕组织中TNF-αR1 mRNA的表达稳定。与正常瘢痕相比无明显差别。【结论】提示在正常伤口愈合过程中TNF-α的作用重要,增生性瘢痕的形成可能与TNF-α在组织中的含量降低有关;增生性瘢痕的形成与TNF-αR1 的表达无相关关系。用基因治疗的方法提高早期增生性瘢痕组织中TNF-α的含量或者提高靶细胞膜上TNF-αR1的数目与活性可能为治疗伤口愈合后瘢痕增生的有效途径。