全自动DNA图像分析(DNA-ICM)在乳腺细针穿刺细胞学(FNAC)诊断中的应用

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目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,近年来在我国,特别是大城市内的发病率呈直线上升趋势。乳腺癌的早期诊断对降低死亡率,提高生存率具有重要意义。乳腺的细针穿刺细胞学(Fine Needle Aspiration Cytology,FNAC)是早期诊断最常用的一种方法。本文研究全自动DNA图像分析(DNA Image Cytometry,DNA-ICM)系统与细针穿刺细胞学(FNAC)在细胞学诊断中的敏感性、特异性、阳性准确率、阳性预测值、阴性预测值,探讨全自动DNA图像分析(DNA-ICM)系统在乳腺细针穿刺细胞学(FNAC)诊断中的应用。同时探讨DNA含量与Ki-67抗原的表达及临床病理特征的关系,为乳腺癌的诊断和评价预后提供一定的理论依据。材料与方法:收集河北医科大学第四医院病理科细胞室2009年9月-2010年1月乳腺肿块行细针穿刺(FNA)患者95例,患者术前均未放疗和化疗,且均无远处脏器的转移。术后组织病理证实浸润性导管癌74例,浸润性小叶癌5例,浸润性小叶,导管混合型乳腺癌1例,腺泡细胞癌2例,髓样癌1例,乳腺腺病8例,乳腺纤维腺瘤1例,导管内乳头状瘤2例,脂肪坏死1例。95例患者术前行细针穿刺(FNA),抽吸足量细胞后,均匀涂于6张玻片,随机分三组,各两张,半湿固定,95%乙醇固定进行涂片细胞学检查、免疫细胞学检测(细胞增殖标志物Ki-67),无水乙醇固定进行DNA倍体检测。细胞学检测是将细针穿刺后的涂片,巴氏染色后,作细胞病理学的描述诊断。DNA-ICM检测是将细针穿刺后的涂片,Feulgen染色后,置于全自动图像分析仪的显微镜上,人工调试到20×的物镜上,自动聚焦,自动扫描,将载玻片上有细胞的部分,划分为1080个小区域,逐一区域扫描,记录扫描数据。自动地测定出每例玻片上所有细胞分类参数,几何参数,图像参数等参数,同时给出横轴为IOD(Integrated Optical Density)值,纵轴为细胞数量的DNA含量分布的直方图;横轴是IOD值,纵轴是细胞核面积的核面积的分布图。同时给出平均DI值(DNA index),标准差,变化系数。所有扫描细胞DNA含量最高的前20例细胞的IOD(Integrated Optical Density)值和镜下影像图片。运用免疫细胞化学检测的方法,检测细针穿刺细胞学(FNAC)涂片中抗原Ki-67的表达情况,同时收集临床资料及术后组织病理资料。结果: 95例患者中乳腺细针穿刺细胞学(FNAC)诊断为乳腺癌的为48例,ICM检测均可见大量的DNA倍体异常细胞,组织病理证实均为乳腺癌;22例FNAC诊断为重度增生乳腺上皮细胞,ICM检测19例可见DNA倍体异常细胞,3例未检测到DNA倍体异常细胞,22例组织病理证实均为乳腺癌。11例FNAC诊断为明显增生乳腺上皮细胞,5例ICM可见DNA倍体异常细胞,组织病理证实4例为乳腺癌,1例为增生性腺病。6例ICM未见DNA倍体异常细胞,组织病理证实5例为乳腺癌,1例为导管内乳头状瘤;14例FNAC检测为良性病变,1例ICM检测可见倍体异常细胞,组织病理证实为良性病变。DNA图像分析(DNA-ICM)系统诊断的阴性预测值不如FNAC诊断(P<0.05);DNA-ICM诊断的敏感性,阳性准确率,阳性预测值均不及DNA-ICM和细针穿刺细胞学(FNAC)的联合诊断(P<0.05);二者联合的各项诊断指标均比单纯的FNAC检测高,但没有统计学意义( P>0.05)随着细胞增生程度的增加,DI均值增加。重度增生的乳腺上皮细胞与明显增生乳腺上皮细胞之间,乳腺癌细胞与重度增生的乳腺上皮细胞之间的DNA含量均有显著的统计学差异( P<0.05);随着细胞免疫化学检测增殖抗原Ki-67分级的增加,DNA含量也增加,且DNA含量的增加具有统计学意义( P<0.05);根据术后组织病理资料分析,DNA含量与肿物大小及组织学分级显著相关( P<0.05),但DNA含量与患者年龄及腋窝淋巴结转移状况无关(P>0.05)结论:1对于大多数乳腺肿物,DNA-ICM和FNAC诊断一致,DNA-ICM可以作为FNAC的一种良好的辅助检测方法。2 DNA-ICM的各项诊断指标均不如FNAC诊断,但DNA-ICM联合FNAC诊断较单一诊断有一定优势。3 DI值随细胞学的分级,增殖抗原Ki-67表达的分级的增高而增高,表明DNA-ICM可以定量反应细胞增生程度。4 DNA含量与乳腺癌患者的年龄,腋窝淋巴结转移状况无关;DNA含量与肿物大小,组织病理分级相关.肿物大,组织分级高,DNA含量也高,提示肿瘤的恶性度大,预后差。
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