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高血压及其引起的心血管疾病是引起人类死亡的主要病因之一。目前治疗高血压药物主要是化学合成的血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂(如卡托普利、赖诺普利、福辛普利、西拉普利),虽然这些合成的ACE抑制剂能够有效降低血压,但它们同时也带来一些负面影响(如头痛、咳嗽、眩晕、疲劳和腹泻)。近年来,因为食物源性ACE抑制肽具有安全性并且营养高,从而受到了人们青睐。远东拟沙丁鱼是东南沿海一种主要的低值海鱼,其蛋白含量高。目前,远东拟沙丁鱼大多加工成饲料、肥料,或少部分制成罐头,资源附加值低。为了提高远东拟沙丁鱼的附加值,本课题以远东拟沙丁鱼为原料,研究其酶解产物的体外ACE抑制活性及体内降血压效果,并进一步分离纯化,探索其结构和抑制机理,主要研究结果如下:(1)以远东拟沙丁鱼肌肉为原材料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过超滤技术进行分离获得3个组分,分别称为A(MW>10kDa)、B(3kDa<MW<10kDa)和C(MW<3kDa)。以体外ACE抑制率作为评价指标,评估活性,结果显示:C的ACE抑制率最大,为71.4%,A的ACE抑制率最低,为34.6%。为了进一步评价C降血压效果,以原发性高血压大鼠为模型,采用灌胃方式,研究其短期(10h)与长期(28d)降血压功效,结果显示:C三种剂量对SHRs大鼠的收缩压有显著降低作用,并且随着剂量的增加,降血压作用越显著。(2)为了阐明C中ACE抑制肽结构,研究其ACE抑制肽构效关系,首先利用Sephacryl S-100凝胶色谱柱将C分成了3个级份,分别称为p1、p2和p3,通过体外ACE抑制活性分析,结果证明p2具有最强的ACE抑制率为76.1%;然后利用Q-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱将级份p2分成3个级份,分别称为p2-1、p2-2和p2-3,通过体外ACE抑制活性分析,发现p2-2具有最强的ACE抑制率为36.2%;最后采用HPLC将p2-2分成5个级份,以体外ACE抑制率为指标,筛选出ACE抑制活性较高的2个级份p2-2-2和p2-2-4,它们的ACE抑制率分别为34.1%和41.6%;为了确定p2-2-2和p2-2-4的结构,采用ESI-MS/MS二级质谱对其氨基酸序列进行测定,结果表明:p2-2-2氨基酸序列Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro,IC50是22.9μM,p2-2-4氨基酸序列为Pro-Ala-Leu,IC50是12.2μM。(3)为了进一步探索Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro和Pro-Ala-Leu进入体内的稳定性,将这2种ACE抑制肽模拟体内消化系统环境进行水解,结果表明:Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro和Pro-Ala-Leu经不同pH处理后以及胃肠消化酶水解后其ACE抑制活性没有显著变化(P>0.05)。探讨了Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro和Pro-Ala-Leu对ACE的抑制类型及其机制,根据它们催化合成底物HHL生成马尿酸的抑制动力学和Linweaver-Burk曲线判断其抑制类型,结果显示:Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro和Pro-Ala-Leu均为竞争性抑制剂。