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猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)是猪圆环病毒病的病原,在最近十几年里,作为一种新发传染病在世界范围内广泛流行。虽然该病造成巨大的经济损失,但目前对于PCV2的发病机理尚不十分清楚。猪圆环病毒2型属于圆环病毒科圆环病毒属成员,基因组为单链环状DNA。PCV2感染主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS),还可引发先天性震颤(congenital tremors,CT),同时对猪的免疫系统产生影响,能诱导免疫抑制。本研究采用SILAC(stable isotope labeling with amino acids in cell culture)结合质谱鉴定的定量蛋白质组学技术对PCV2感染PK-15细胞的差异表达蛋白进行分析,试图从细胞和蛋白质水平探讨PCV2在PK-15细胞中的复制与致病机理。 结果显示,在PCV2感染PK-15细胞72小时后,基于SILAC的质谱分析方法共成功的鉴定出1341个蛋白,其中差异表达蛋白为163个,包括79个上调表达蛋白和84个下调表达蛋白。这些受调控的差异表达蛋白在一些细胞的功能方面发挥着重要的作用,包括参与物质转运、细胞骨架重塑和应激反应等生理过程。Western blot验证部分选定蛋白的表达水平,与定量蛋白质组的分析结果一致。采用IPA(IngenuityPathways Analysis)软件对鉴定到的蛋白进行生物信息学功能分析,挖掘宿主细胞应对病毒感染时蛋白的调节机制和蛋白之间相互作用的变化。结果表明,钙蛋白酶(Calpain-1)的上调表达与下游底物的表达下调,可能在PCV2的感染和致病中扮演重要的角色;输入蛋白(importin)增加可能有利于病毒蛋白转运和自身增殖,热休克蛋白(heat shock protein)下降可能抑制宿主对抗病毒入侵的能力。而通过功能性蛋白相互作用网络图的构建和通路分析,为进一步理解和探索病毒与宿主间相互作用的复杂性和多变性以及猪圆环病毒感染的致病机理,提供了丰富的理论基础。