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目的:腹膜纤维化是终末期肾脏病患者长期进行腹膜透析后所出现的常见并发症之一,主要表现为腹膜结构的改变及功能的丧失,可导致腹膜超滤衰竭而使患者被迫终止腹膜透析治疗,进一步进展还可能出现包裹性腹膜硬化症,严重威胁患者生命健康,而目前临床上尚未有治疗腹膜纤维化的特效药物。近年的大量研究表明龙胆苦苷在纤维化疾病中有较好的治疗效果,如肝纤维化、肺纤维化、糖尿病肾纤维化等,但目前尚未见其在腹膜纤维化中有相关研究。基于此,本研究通过4.25%腹膜透析液+脂多糖构建大鼠腹膜纤维化模型,给予龙胆苦苷干预后观察其对腹膜纤维化大鼠腹膜损伤的影响并探讨龙胆苦苷干预大鼠腹膜纤维化的机制,为腹膜纤维化的治疗寻找新方向。方法:1、动物模型与分组30只SD大鼠随机分为五组:生理盐水组（NS）、模型组（M）、龙胆苦苷低剂量组（30 mg/kg）（GPS30）、龙胆苦苷中剂量组（60 mg/kg）（GPS60）和龙胆苦苷高剂量组（120 mg/kg）（GPS120）,每组各6只。NS组腹腔注射无菌生理盐水（100 m L/kg,1/日）,M组注射4.25%腹膜透析液（100 m L/kg,1/日）,GPS组腹腔注射GPS溶液（100 m L/kg,1/日）,M组和GPS组在给药的第1、3、5、7天联合注射脂多糖溶液（0.6mg/kg）,均采用左下腹注射,持续注射28 d。2、腹膜功能检测于造模第28 d注射上述药物1 h后腹腔注射4%水合氯醛（10m L/kg）麻醉,待完全麻醉后取大鼠腹腔内尚未被吸收的残余液体测超滤量（UF）、初始腹透液与透出液葡萄糖比值（D1/D0）、透析液与血浆尿素氮比值（D/P urea）、葡萄糖转运量（MTG）来间接评估小鼠腹膜功能。3、组织病理染色大鼠腹壁层腹膜组织取材后4%多聚甲醛固定,然后进行石蜡包埋,切片。按照HE、Masson的实验步骤进行染色,封片后显微镜进行拍照。4、炎症和氧化应激指标检测大鼠腹主动脉血离心后去血清,然后使用丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）生化试剂测定血清中MDA含量及SOD、GSH-px活性,使用酶联免疫吸附试验测鼠血清中白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平。5、免疫组织化学染色将制作的壁层腹膜组织石蜡切片进行烤片、脱蜡、水化、抗原修复、灭火、封闭、抗体结合、显色、复染、封片,最后在显微镜下观察α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、Ⅰ型胶原（COL I）蛋白的表达及分布情况,拍照后使用Image J软件分析蛋白表达水平。6、组织与细胞蛋白检测使用总蛋白提取试剂盒提取大鼠脏层腹膜组织总蛋白。BCA法测定组织蛋白浓度后加入蛋白上样缓冲液煮沸变性,然后分装置于-20℃冰箱保存以备后续使用。通过蛋白免疫印迹法检测组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad3、Smad7、α-SMA、E-cadherin、COL I、NALP3蛋白的表达水平。结果:1、GPS对PF大鼠腹膜功能及形态结构的影响腹膜功能测定显示,透析28 d以后,经腹腔注射4.25%高糖腹膜透析液+脂多糖建立的腹膜纤维化模型大鼠的UF显著下降、MTG显著升高（P＜0.05）,腹膜平衡试验显示D/P urea显著上升、D1/D0显著下降（P＜0.05）,腹膜功能下降;龙胆苦苷干预后腹膜功能明显好转（P＜0.05）。HE和Masson染色显示,M组大鼠腹膜厚度显著增加（P＜0.01）,可见腹膜间皮细胞脱落、缺失,细胞外基质和胶原纤维沉积,并可见炎症细胞浸润、纤维细胞及血管增生明显增多;GPS各组腹膜厚度显著降低（P＜0.01）,炎症细胞浸润及增生血管生成减少,间皮下胶原纤维沉积不明显。2、GPS对PF大鼠炎症和氧化应激水平的影响生化检测结果提示,M组大鼠血清中MDA含量显著增多,SOD、GSH-px活性显著下降（P＜0.01）;酶联免疫吸附试验提示IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著增加（P＜0.01）;GPS各组的氧化应激及炎症水平显著下降（P＜0.05）。3、GPS对PF大鼠EMT进程相关分子的影响免疫组化及蛋白免疫印迹结果显示,M组α-SMA、COL I蛋白表达显著增加,E-cadherin蛋白表达显著降低（P＜0.01）;GPS干预后可见α-SMA、COL I表达量显著下降（P＜0.01）,E-cadherin表达量上升（P＜0.05）。4、龙胆苦苷对TGF-β/Smads通路分子及炎症和氧化应激水平的影响Western blot结果显示,M组大鼠TGF-β1、Smad3、α-SMA、COL I、NALP3蛋白表达量显著增加,Smad7、E-cadherin蛋白表达显著降低（P＜0.01）。龙胆苦苷则能抑制TGF-β1、Smad3、α-SMA、COL I、NALP3蛋白的表达,提高Smad7、E-cadherin蛋白表达水平,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。结论:1、使用4.25%腹膜透析液+脂多糖腹腔注射28天可成功建立腹膜纤维化大鼠模型。2、龙胆苦苷可减轻4.25%腹膜透析液联合脂多糖诱导的腹膜纤维化大鼠模型的病变程度,其机制与抑制氧化应激与炎症反应及减缓腹膜间皮细胞间质转化进程有关。