微生物侵入并感染根管系统是导致牙髓及根尖周炎症的最主要的原因,因此根管治疗的成功有赖于对根管内微生物的彻底清除。但有些患牙虽经过完善严密的根管治疗,症状仍然迁延不愈,即所谓的顽固性根尖周炎,主要由兼性厌氧的革兰氏阳性细菌引起,特别是粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E.f)等。E.f在根管治疗失败的患牙根管中检出率特别高,这与它可形成细菌生物膜、可侵入牙本质小管及抵抗各种不利环境等特点息息相关。由于根管系统解剖结构及根管内微生物极其复杂,传统的根管机械预备联合化学冲洗的方法仍很难将根管内的微生物完全杀灭。所以为了去除更多的根管壁感染牙本质,有学者建议进行较大的根尖预备。而且近年来ProTaper、GT、Mtwo等大锥度根管镍钛器械也越来越广泛的应用于临床。增加根管预备的直径和锥度虽有助于根管内微生物的清除,但同时也削弱了牙根的结构,降低了牙根的抗折强度。因此,如何开发一种新型的根管消毒方法,既可以有效杀灭根管内微生物,又可以最大程度保存牙体组织,是我们面临的一大挑战。近些年来,PIPS-Er:YAG激光被逐渐引入牙髓病学领域并显示出了其优越的杀菌效果。我们前期的研究结果也显示PIPS-Er:YAG激光与次氯酸钠冲洗液联合使用时对根管内E.f的清除效果最为理想。但是此研究模型将根管进行了过大的预备,并不能反映临床实际应用效果。故本实验拟通过在微创预备的根管内(15#/0.04)建立e.f感染根管模型,比较pips-er:yag激光在不同照射时间及不同根尖终末工作宽度时的杀菌效果,并就不同根尖终末工作宽度对牙根抗折强度的影响进行了研究,以期探索更为有效且更加微创的根管治疗方法。实验共分为以下四个部分:一、不同根尖终末工作宽度对根管内粪肠球菌清除效果的研究体外建立粪肠球菌感染根管模型后,将样本随机分为以下六组:机械化学预备组分为四个亚组,分别将根管预备至20#、25#、30#、40#(锥度均为0.04),然后用5.25%次氯酸钠处理1min;次氯酸钠组和生理盐水组分别用5.25%次氯酸钠液或生理盐水处理各根管1min。最后采集各组样本处理后根管壁各层的牙本质碎屑并进行细菌培养、计数,分析并比较各组的细菌清除效果。结果显示:在100~200μm和200~300μm牙本质深度处,次氯酸钠组及机械化学预备组的杀菌效果均优于生理盐水组(p<0.05);除次氯酸钠组与机械化学预备20#组间杀菌效果无统计学差异(p>0.05)外,其他各组间两两相比均有统计学差异(p<0.05);将根管机械化学预备至40#/0.04时,其在100~200μm和200~300μm的细菌清除率分别为93.56%和85.12%。结果表明增加根尖终末工作宽度可以提高根管内e.f的清除效果,但即使将根管预备至40#/0.04联合次氯酸钠化学冲洗尚不能完全清除根管壁深层(100~200μm和200~300μm)的e.f。二、根尖终末工作宽度对牙根抗折强度影响的研究将样本随机分为以下五组:四个实验组分别将根管预备至20#、25#、30#、40#(锥度均为0.04);对照组不作任何处理。然后用万能试验机对各组样本的抗折强度进行测量和分析。结果显示:除对照组与机械预备20#组、25#与30#两组间抗折强度无统计学差异(p>0.05)外,其他各组间两两相比均有统计学差异(p<0.05);各组相对于前一组的抗折强度减少率分别为0.8%、43.6%、10.6%、61.4%,其中40#组最高(61.4%),其次为25#组(43.6%)。结果表明增加根尖终末工作宽度会降低牙根的抗折强度,尤其是当根尖工作宽度由30#增加至40#,或由20#增加至25#时,更会使牙根抗折强度发生大幅下降。三、pips-er:yag激光在不同照射时间时对根管内粪肠球菌杀灭效果的研究体外建立粪肠球菌感染根管模型后,将样本随机分为以下五组:pips-er:yag激光加次氯酸钠组按激光处理时间分为三个亚组:pips-er:yag/naclo30s、pips-er:yag/naclo1min、pips-er:yag/naclo2min;次氯酸钠组和生理盐水组分别用5.25%次氯酸钠溶液或生理盐水处理各根管。结果显示:pips-er:yag/naclo组三个亚组在根管壁各深度处的杀菌效果均优于次氯酸钠组和生理盐水组(P<0.05);激光组三个亚组在根管壁表面及根管壁0~100μm处的杀菌效果相当(P>0.05),杀菌率均在98%以上;在根管壁100~200μm和200~300μm深度处时,PIPS-Er:YAG/NaClO 1min和2min二组的杀菌效果均优于30s组(P<0.05),且1min、2min二组杀菌效果相当(P>0.05)。结果表明PIPS-Er:YAG激光可以促进次氯酸钠的杀菌效果,二者联合使用可有效杀灭根管壁浅层(根管壁表面及0~100μm)的E.f。增加Er:YAG激光的照射时间虽可有效增强其杀菌效果,但是在本实验的根管模型中(15#/0.04),即使延长Er:YAG激光的照射时间仍不能完全清除根管壁深层(100~200μm和200~300μm)的E.f。四、PIPS-Er:YAG激光在不同根尖终末工作宽度时对根管内粪肠球菌杀灭效果的研究体外建立粪肠球菌感染根管模型后,将样本随机分为四组:(1)机械预备/Er:YAG/NaClO处理组共4个亚组,分别将根管预备至20#、25#、30#、40#后,用PIPS-Er:YAG激光加5.25%次氯酸钠处理1min;(2)Er:YAG/NaClO处理组,用PIPS-Er:YAG激光加5.25%次氯酸钠处理1min;(3)次氯酸钠组用5.25%次氯酸钠溶液处理各根管;(4)生理盐水组用生理盐水处理各根管。结果显示:20#/Er:YAG/NaCl O组与40#/NaClO组(实验一)二组在100~200μm和200~300μm根管壁深度处的杀菌效果均相当(P>0.05);30#/Er:YAG/NaClO组在100~200μm和200~300μm深度的细菌清除率分别为99.81%和99.05%。结果表明,将根管预备至20#/0.04后用PIPS-Er:YAG/NaClO处理可以达到将根管机械化学预备至40#/0.04同等的杀菌效果。将根管预备至30#/0.04后用PIPS-Er:YAG/NaClO处理更是可有效杀灭根管壁深层(100~200μm和200~300μm)的E.f,其杀菌率可达99%以上。综上所述,PIPS-Er:YAG激光辅助用于根管治疗中时,既可以有效清除根管壁深层的E.f,又可以最大程度的保存牙体组织,降低根管治疗后牙齿发生根折的风险,因此有望将PIPS-Er:YAG激光辅助用于微创根管治疗当中。