姬菇原生质体技术的研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hu_20092009
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本论文对影响姬菇原生质体制备、再生的条件进行了研究。结果表明:以液体静置MYG培养基培养3天的菌丝体,以2%的溶壁酶作为酶解液,在30℃下,0.6m/moL硫酸镁作为渗透压稳定剂,酶解3h为制备姬菇原生质体的最佳条件,以菌龄为1d,酶解时间为1h,0.6mol/L蔗糖作为渗透压稳定剂的PDA再生培养基为姬菇原生质体再生的最佳条件,再生率达4.5%。对影响姬菇5号与署优1号原生质体PEG融合的条件进行了研究。结果表明:以PEG6000的浓度应为35%,Ca2+浓度应为0.010mol/L,融合时温度应在30℃,PEG处理时间为20min,PH为8.0为姬菇5号与署优1号原生质体PEG融合的最佳条件,融合率达3.3×10-4。对影响姬菇5号与署优1号原生质体电融合的条件进行了研究。结果表明:交流电场频率为1500KHz,交流电场强为300V/cm,直流脉冲场强为2.5KV/cm的,脉冲宽幅为60μs时,脉冲次数为4~5次,电融合液甘露醇浓度10%,CaCl2浓度0.4mmol/L浓度为姬菇5号与署优1号原生质体电融合的最佳条件,融合率达21%。
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