Rs-afp基因和γ-tmt基因转化花生及高效遗传转化体系的研究

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该研究选用6个花生栽培品种,研究了外植体类型、生理状态、基因型、培养基激素等因素对花生离体培养再生的影响,明确了器官发生途径、胚胎发生途径的技术条件和再生效率,建立了高效的花生叶片离体培养植株再生体系.首次发现了营养器官组织培养诱导开花现象,探讨了关键技术,提出了花生在试管内开花、自交、结实完成生活周期,加快育种进程的新途径.研究优化了农杆菌介导途径进行花生遗传转化的技术要素,建立了高效的遗传转化体系.利用这一体系,分别把抗真菌的γ-硫堇蛋白(Rs-afp<,1>)基因和能提高维生素E活性的γ-维生素E甲基转移酶(γ-tmt)基因导入花生栽培品种,获得转基因植株.通过对标记基因、报告基因的PCR检测,以及对目的基因的PCR检测、PCR-Southern-blotting分析和Southern-blotting分析,证明这些基因已整合到花生基因组中.据此,提出了花生基因转化的优化途径和技术规程.取得的主要研究结果如下:1、花生组织培养离体再生体系的研究;2、遗传转化影响因素的研究;3、Rs-afp1基因转入花生栽培品种;4、γ-tmt基因转入花生主栽品种;5、农杆菌介导途径进行花生遗传转化的技术规程;
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