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目的:认知障碍降低患者生活质量,占用社会有限的医疗资源,给患者、家庭和社会均带来严重不良后果。近几年的研究结果表明,感染、手术等诱发的急性系统性炎症可能与认知障碍发病和病程进展相关。星形胶质细胞是中枢系统中数量最多的神经细胞,参与构成血脑屏障,发挥营养、支持、保护神经元的作用,对神经元生存起至关重要的作用。既往研究表明,中枢炎症可激活星形胶质细胞发生增殖和功能改变,进而改变中枢内环境,最终导致认知障碍。然而,对于急性系统性炎症发生时,星形胶质细胞的结构和功能如何改变,尚缺乏系统、动态地观察和研究。本研究拟通过观察急性系统性炎症近期和远期,败血症大鼠认知功能改变和海马星形胶质细胞超微结构以及核因子-κ B信号转导通路蛋白表达的变化,探讨急性系统性炎症相关认知障碍发病机制,为进一步探索防治相关疾病的有效方案提供实验依据。
方法:(1)成年健康雄性Wistar大鼠36只,随机分为3组:对照组:腹腔注射盐水;致炎组:腹腔注射LPS(10mg/kg);拮抗组:腹腔注射LPS(10mg/kg)和小白菊内酯。在LPS注射后第7天和第16天应用Morris水迷宫实验观察大鼠认知功能改变;(2)成年健康雄性Wistar大鼠65只,分为5组:空白组和注射后1、3、7、16天组,每组13只。其中,每组取5只大鼠应用于荧光免疫组化实验,检测其海马CA1区激活的星形胶质细胞胞核内NF—κ B65表达和细胞凋亡;5只大鼠应用于酶联免疫吸附法实验,观察其海马IL-1β表达;其余3只大鼠应用于电镜观察实验,观察海马CA1区超微结构改变。
结果:(1)急性系统性炎症近期,定位航行实验结果显示动物空间学习能力降低,表现为:与空白对照组相比,致炎组寻台持续时间和路程均显著延长(P<0.05)、拮抗组未见显著差异,平均速度各组间无显著差异,提示实验干预未影响运动能力;空间探索实验结果显示空间记忆能力降低,表现为:与空白对照组相比,致炎组第二象限停留时间和路程缩短、第一次穿越时间延长、穿越次数减少(P<0.05),拮抗组未见显著差异。急性系统性炎症远期,各组间定位航行实验和空间探索实验未见显著差异。(2)腹腔注射LPS后,各组大鼠海马CA1区NF—κ B65表达均增加,注射后第3天达高峰,至第16天表达水平仍然较高,与空白对照组相比,有显著性差别(P<0.05);凋亡细胞数目显著增加(P<0.05),注射后第3天达高峰,至第16天仍与空白组存在显著差异;海马IL-1β表达显著升高(P<0.05),第3天达到高峰,第16天回落。电镜观察可见星形胶质细胞足突肿胀,毛细血管管腔受压,神经元呈现缺氧超微结构改变,以第1、3天较为严重,第7天开始有所缓解,至第16天仍可见星形胶质细胞和神经元超微病理改变。
结论:急性系统性炎症引起认知功能改变可能与激活海马星形胶质细胞NF-κ B转导通路致中枢炎症和血脑屏障损伤相关。