本实验通过体外培养兔子半月板纤维软骨细胞,观察其生物学特性及最佳的培养时间,鉴定细胞,并通过纤维凝胶作为组织工程的支架材料,观察纤维凝胶和半月板纤维软骨细胞的相容性、建立半月板损伤动物模型,将组织工程半月板植入半月板损伤动物模型膝关节内。初步观察植入的纤维软骨细胞-纤维蛋白凝胶复合物对损伤半月板的愈合有无影响。种子细胞的获取:从一个月龄兔子膝关节内切除半月板组织,经胶原酶的消化而获取兔子膝关节半月板纤维软骨细胞,进行原代和传代体外单层培养。测定原代和传代的纤维软骨细胞的生物学特性:研究方法包括细胞倒置显微镜下的形态表现,细胞计数,免疫组化染色,甲苯胺蓝染色,生长曲线等。构建纤维软骨细胞-纤维蛋白凝胶复合,将第三代纤维软骨细胞与纤维凝胶支架结合,并植入半月板损伤动物模型膝关节内,观察对损伤半月板的愈合的影响。半月板纤维软骨细胞在体外培养,可获取大量细胞。并将体外培养获得的细胞经Ⅰ型和Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性,显示细胞内含有Ⅰ型和Ⅱ型胶原(主要是Ⅰ型胶原)。甲苯胺蓝染色异染性强,显示蛋白多糖(主要是糖胺聚糖,GAG)的合成,胶原和GAG是半月板的细胞外基质的主要成分,这些检测的阳性结果均显示了半月板纤维软骨细胞的特性。术后4、6周,纤维软骨细胞-纤维蛋白凝胶复合物修复组以类半月板组织修复缺损,单纯纤维蛋白凝胶修复组和未加任何移植物组的缺损区未见修复。