脑选择性深、低体温停循环对大鼠海马区miRNA表达变化的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wwx3572205
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[目的]建立大鼠深、低体温停循环模型,提取脑组织海马区miRNA,在miRNA水平讨深低温对脑保护的机制。[方法]选用昆明医科大学动物实验室提供的健康成年清洁级(Sprague-Dawley,SD)大鼠28只,体重410-620g左右,雌雄不限。随机分为3组,每组6只,分别为常温停循环组(NTCA)、亚低温循环组(HCA)、深低温循环组(DHCA),5只作为体外循环预冲液的配置,其余5只为假手术组(不停循环)。具体操作如下:常温停循环(NTCA)组:体外循环建立成功后,通过可调节温度的水箱维持其肛温(36.8℃-37℃)下体外循环10min,再停循环10min。亚低温停循环(HCA)组:体外循环建立成功后,通过变温水箱、冰袋、冰屑等降温手段使大鼠肛温迅速降至≤28℃下体外循环(Cardiopulmonary bypass,CPB)10min,维持此温度再停循环10min。深低温停循环(DHCA)组:体外循环建立成功后,通过变温水箱、冰袋、冰屑等降温手段使大鼠肛温迅速降至≤20℃下CPB1Omin,维持在此温度下再停循环10min。然后快速断头提取脑组织,分离大鼠海马标本提取总RNA,利用基因芯片技术及Q-PCR技术检测miRNA的表达变化情况,实验数据运用SPSS19.0软件进行分析。[结果]深低温循环组内海马区一共有38个miRNAs表达改变,其中有14 个表达差异明显,包括 rno-miR-34c-5p、rno-miR-493-3p、rno-miR-204-3p、rno-miR-183-5p、rno-miR-204-5p、rno-miR-448-5p、rno-miR-764-5p、rno-miR-1298、rno-miR-448-3p、rno-miR-182、rno-miR-497-5P、rno-let-7c-5a 等,对这些 miRNAs 靶点的预测分析揭示DHCA的生理过程涉及多个靶点参与和生物学功能。[结论]DHCA后脑损伤涉及到一系列miRNAs的表达的变化,可为深低温停循环脑损伤的机制提供新的科学依据及研究方向。
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