钝顶螺旋藻中活性成份的提取、分离与纯化(Ⅲ)

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钝顶螺旋藻是70年代以来国际上生物学工作者广泛研究和开发利用的一种新的植物蛋白资源。该藻具有广阔的开发前景,可作为食品添加剂、饲料、保健食品和医药原料。目前,我国对螺旋藻的研究与开发工作已有了很大发展,特别是螺旋藻的种、养殖技术已达到了国际领先水平,但螺旋藻的深加工及应用研究滞后,工业化生产尚未规模化。研究工作者已对螺旋藻最具有开发前景的药用成份藻蓝蛋白,Y-亚麻酸,β-胡萝卜素,螺旋藻多糖的提取、分离及纯化进行了研究,但对其它方面的应用研究较少。为了拓宽螺旋藻的应用,我们研究了可以用于荧光检疫的藻蓝素二甲酷的合成及纯化。 藻蓝素二甲酷是由藻蓝素与甲醇发生酯化反应合成的一种鲜艳的蓝色素,它与藻蓝蛋白的性质相似,可以制成荧光探针,在癌症和白血病等临床诊断利生物 工程研究中有广泛的用途。我们选用合成藻蓝素二甲酯的方法是:首先用表面活性剂从螺旋藻粉中提取出藻蓝蛋白,然后用甲醇离解硫醚键制备藻蓝素,再由藻蓝素与甲醇在催化剂的作用下便成藻蓝素二甲配。在实验过程中我们选用了三种催化性能较好的催化剂,采用正交试验进行了最佳工艺条件的考查。在用三氯氧磷作催化剂时最佳工艺条件为:反应温度为55℃,反应时间为30min,藻蓝素与甲醇之比为1:100,催化剂与甲醇之比为6:100,在此条件下反应收率为42.8%。这种方法的催化剂使用起来比较方便,但产率比其它两种催化剂要低。用二氯亚砜吡啶盐作催化剂时最佳工艺条件为:反应温度为50℃,反应时间30min,催化剂与甲醇之比为6:100,藻蓝素与甲醇之比为1:100,反应收率为53.7%。这种方法收率较高,但催化剂不易制备,并且反应的后处理比较麻烦。以四氯铝醚溶液为催化剂时最佳工艺条件为:反应温度40℃,反应时间为15min,催化剂与甲醇之比为14:100,藻蓝素与甲醇之比为1:100,反应收率是47.7%。这种方法反应温度比其它两种催化剂的反应温度要低,反应速度较快,催化剂也易制备,因此,适于实验室进行催化酯化反应及一定规模的生产。 藻蓝素二甲酷是以四氯化碳:乙酸乙酯等于2:l的混和溶液作为溶剂系统,在硅胶薄层层析或柱层析进行分离纯化的。我们用IR,UV,MS对藻蓝素二甲酯进行了鉴定,并对其溶液构象性质作了初步分析。
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