变形链球菌氟化物抗性机制的研究

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氟化物的性质非常丰富,广泛用于卫生产品。在过去的70年中,氟化物在促进口腔健康中发挥重要作用,氟化物是有效的防龋剂。氟化物会干扰生物体的代谢过程,而高浓度的氟化物则具有杀菌作用。许多国家在饮用水、牙膏和漱口液中都添加氟离子,以防止龋齿。含氟产品的使用明显减少龋齿,但氟化物对细胞有毒的机制尚未完全了解,氟在预防龋齿中的确切机理不完全清楚。本论文以变异链球菌(Streptococcus mutans)UA159为研究对象,围绕抗性机制和是否具有公共安全威胁两个问题,通过正向遗传学的手段筛选抗性菌株,定位抗性相关基因,进而揭示氟化物的抗性机制。并评估抗性菌株潜在的毒力特征变化。(1)在变异链球菌UA159中运用转座诱变系统构建转座子突变库,筛选氟化物抗性菌株。对得到的耐氟性菌株进行测序,获得两种转座子smu.1291Tn和smu.396Tn。对两个抗性菌株进行氟化物检测,发现其具有稳定的耐氟性。(2)smu.396IFD,获得的无痕敲除菌检测其具有氟化物抗性。(3)smu.1291IFD,获得无痕敲除菌检测其不具有氟化物抗性,smu.1291下游的两个基因smu.1289-90OE,获得的过表达菌株检测其具有氟化物抗性。(4)smu.1289-90OE/smu.396IFD,检测其氟化物抗性相比smu.396IFD和smu.1289-90OE有所增加。(5)对菌株进行表型检测,表明适应性无显著增强。结论:本论文猜测smu.396基因参与细胞内氟离子摄入,smu.1289-90基因参与细胞内氟离子外排。本研究中产生的耐氟化物菌株并未显示出增强的适应性。
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