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目的研究IL-17A (interleukin-17,以下简称IL-17)及相关细胞因子在α-萘异硫氰酸酯(α-naphthalene isothiocyanate, ANIT)致胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型肝脏、回肠组织中的表达及相互关系,探讨其是否参与胆汁淤积性肝炎、肝纤维化的形成及肠黏膜屏障损伤。方法24只雄性远交群(sprague dawley, SD)大鼠,体重180±30g,随机分为三组：空白对照组、蓖麻油对照组及ANIT实验组,每组大鼠各8只。空白组不予任何处理；蓖麻油组予蓖麻油灌胃,5ml/kg体重,每周1次,共5次；ANIT组予2%的ANIT(蓖麻油配置)灌胃,100mg/kg体重或5ml/kg体重,每周1次,共5次。第5次灌胃48小时后处死各组大鼠。大鼠予20%乌拉坦麻醉后开腹,腹主动脉取血,检测大鼠外周血中总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰氨转肽酶(γ-GT)、总胆汁酸(TBA)浓度；酶联免疫吸附试验(ELISA)测外周血IL-17、IL-4及γ干扰素(interferon-gamma, IFN-Y)含量；苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织、回肠组织病理变化；Masson染色观察肝组织纤维化改变；免疫组织化学染色测肝组织IL-17、IL-4及IFN-γ蛋白表达；实时荧光定量PCR法(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)测大鼠肝组织、回肠组织IL-17、IL-4及IFN-γ mRNA的表达水平。结果 1.肝组织、回肠组织HE染色病理形态学示：空白组及蓖麻油组,肝小叶及汇管区结构正常,肝细胞无变性、坏死,汇管区无炎症细胞浸润,毛细胆管无胆汁淤积,无胆管及纤维组织增生；ANIT组汇管区扩大伴大量炎性细胞(淋巴细胞、浆细胞及嗜酸性粒细胞)浸润,胆管增生,管腔内可见坏死脱落细胞,胆管腔阻塞,胆管周围纤维组织增生；空白组、蓖麻油组及ANIT组回肠黏膜绒毛完整,上皮细胞排列整齐,无变性、坏死；肝组织Masson染色镜下观察可见ANIT组胆管周围胶原纤维沉积。2.肝组织免疫组织化学染色分析结果示：IL-I 7、IL-4及IF-γ在ANIT组中的表达结果均为阳性；在空白组、蓖麻油组中的表达结果均为阴性。3.对腹主动脉血行肝功能检测,ANIT组ALT(437.42±156.37)u/L浓度明显高于空白组(38.63±12.65)u/L及蓖麻油组(60.67±11.48)u/L;ANIT组AST(492.42±179.89)u/L浓度明显高于空白组(132.38±30.25)u/L及蓖麻油组(132.67±35.90)u/L；ANIT组Y-GT(13.33±5.12)u/L浓度明显高于空白组(2.25±0.46)u/L及蓖麻油组(2.5±0.84)u/L；ANIT组ALP(862.79±279.12)umol/L浓度明显高于空白组(256.25±89.83)umol/L及蓖麻油组(209.17±49.37)umol/L;ANIT组TBil(147.53±23.35)umol/L浓度明显高于空白组(0.52±0.12)umol/L及蓖麻油组(0.6±0.14)umol/L；ANIT组DBil(117.21±20.55)umol/L浓度明显高于空白组(0.38±0.13)umol/L及蓖麻油组(0.47±0.12)umol/L；ANIT组TBA(226.19±26.82)umol/L浓度明显高于空白组(16.38±5.04)umol/L及蓖麻油组(14.53±4.41)umol/ L,差异均有统计学意义(p<0.01)。4.ANIT组外周血IL-17含量(216.69±15.53)pg/ml高于空白组(112.25±15.82)pg/ml及蓖麻油组(111.53±8.28)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.01)：ANIT组外周血IL-4含量(27.14±1.59)pg/ml稍高于空白组(26.68±0.26)pg/ml及蓖麻油组(26.74±0.25)pg/ml,/kNIT组外周血IFN-Y含量(25.53±8.45)pg/ml稍高于空白组(24.29±8.06)pg/ml及蓖麻油组(20.58±8.01)pg/ml,差异均无统计学意义(P>0.05)。5.ANIT组IL-17mRNA表达量(3.39±1.31)高于空白组(1-31±0.15)及蓖麻油组(1.30±0.25),差异有统计学意义(P<0.05)；ANIT组肝组织IFN-γ mRNA表达量(31.60±14.87)高于空白组(7.35±1.07)及蓖麻油组(6.87±0.62),差异有统计学意义(P<0.01)；ANIT组IL-4mRNA表达量(4.19±1.31)比空白组(3.80±1.07)及蓖麻油组(3.52±0.77)稍高,差异无统计学意义(P>0.05)。ANIT组回肠组织IL-17mRNA表达量(2.28±0.92)高于空白组(0.62±0.23)及蓖麻油组(0.57±0.09),IL-4mRNA的表达量(0.64±0.28)高于空白组(0.25±0.10)及蓖麻油组(0.20±0.03),差异均有统计学意义(P<0.01)；IFN-γmRNA的表达量(6.18±2.84)高于空白组(2.33±0.73)及蓖麻油组(2.39±0.51),差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.IL-17及IFN-γ可能通过发挥促炎、促纤维化作用参与大鼠胆汁淤积性肝炎、肝纤维化的形成；IL-4可能与大鼠胆汁淤积性肝炎、肝纤维化的形成无明显相关性。2.IL-17、IL-4及IFN-γ可能与大鼠胆汁淤积性肝炎肠黏膜屏障损伤有关。