慢病毒介导的TGF-β3、CTGF、TIMP1联合转染兔退变椎间盘的生物学效应

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目的研究慢病毒(Lentiviral)介导的转化生长因子β3(transforming growth factor-β3, TGF-β3)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase1, TIMP1)多基因联合转染兔退变椎间盘的生物学效应。方法新西兰大白兔15只,雌雄各半,一岁龄,体重(2.5—3.0kg),采用纤维环穿刺法建立椎间盘退变模型(L3/4、L4/5、L5/6);实验组注入携带TGF-β3、CTGF和TIMP1基因的慢病毒颗粒50UL,对照组注入等量空病毒,各组在相同条件下独立培养,分别于术后16周、20周对各组新西兰兔MRI拍摄,应用RT-PCR测定各组Ⅱ型胶原mRNA及蛋白多糖mRNA勺表达,Western-blot测定蛋白多糖和Ⅱ型胶原含量,观察多基因联合转染对退变椎间盘的生物学效应。结果MRI显示实验组椎间盘退变程度较对照组及穿刺组低,实验组髓核细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达高于穿刺组与对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论TGF-β3、CTGF和TIMPI多基因联合转染后可以促进体内蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成,从而起到延缓椎间盘退变的作用。
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