肿瘤实时个体化疗——药物预测分子在恶性胸腹水中的检查及意义

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目的:探讨基因mRNA表达与化疗药物敏感性之间的关系;探索恶性胸水/腹水游离RNA的提取方法,研究游离上清中药物预测分子的表达与相应细胞药物敏感性之间是否存在一定关系。 方法:采用实时荧光定量PCR方法检测肿瘤细胞相关基因表达;通过试验蛋白酶水解法、Trizol提取和Trizol LS提取三种不同方法,结合改善沉淀条件、优化提取步骤等途径,探索恶性胸水/腹水游离RNA的最佳提取条件。采用实时荧光定量PCR方法检测肿瘤细胞相关基因表达。 结果:我们的结果表明:①ERCC1在肺癌和未接受过治疗的胃肠肿瘤患者的恶性胸腔、腹腔积液中的表达水平与顺铂药物抵抗正相关;②BRCA1在肺癌和胃肠肿瘤患者的恶性胸腔、腹腔积液中的表达水平与顺铂药物抵抗正相关;③TS在未接受过治疗的胃肠肿瘤患者恶性腹腔积液中的表达水平与5—FU药物抵抗正相关;④BRCA1在肺癌和胃肠肿瘤患者的恶性胸腔、腹腔积液中的表达水平与多希紫杉醇药物抵抗负相关;⑤β-tubulinⅢ在肺癌患者的恶性胸腔积液中的表达水平与多希紫杉醇药物抵抗正相关;⑥BRCA1 mRNA表达水平在恶性体腔积液中的表达水平与HCPT药物敏感性无关;⑦BRCA1和ERCC1对顺铂药物敏;⑧在符合标本收集条件的43例样本中全部检测到了游离β-actin的扩增,证实了恶性胸腔/腹腔积液中游离RNA的存在;⑨TS mRNA在上清中的表达水平高于其在肿瘤细胞的表达水平(P=0.02);⑩β-tubulin ⅢmRNA的表达水平在上清中和在肿瘤细胞中相比没有显著性差异(P=0.117)。 结论:实ERCC1、BRCA1、TS及β-tubulinⅢ药物疗效相关基因在转移性恶性胸腔/腹腔积液中仍然与相应药物的敏感性相关;胸腹水中游离RNA的来源有可能主要为恶性胸水/腹水中的肿瘤细胞,同时游离TSmRNA表达水平在胃肠肿瘤组与5—FU药物敏感性相关。
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