巴马香猪在作为遗传、发育、疾病模型以及提供异种移植器官等方面具有其它动物不可替代的优势,并广泛应用于心血管系统以及异种脏器移植等研究中。巴马香猪的血液生理生化指标是病理、生理以及毒理学研究工作的重要基础性指标,也是判定巴马香猪生理状态的重要依据。但小型猪作为新兴的大型实验动物饲养标准还未统一,为防止小型猪过度采食导致长胖,许多研究单位对小型猪饲养采取限饲,这可能导致血液生理生化指标的测定产生误差。化学诱变剂ENU进行遗传修饰是制备疾病动物模型的新方法,并且与传统的基因敲除和基因转入的方法相比,速度更快、挖掘基因的力度更高,可以在短时间内产生数目巨大的突变动物。由于ENU诱变的随机性以及不确定性,筛选突变疾病动物模型的技术和方法就显得尤为重要,通过对ENU诱变后F1代巴马香猪进行血液生理生化指标筛查,不仅能很好的完善和补充疾病动物模型的筛选方法,并能获得血液指标异常个体。因此我们在本实验中,将336头断奶巴马香猪根据限饲水平的不同随机分为对照组、80%日粮组和50%日粮组,在60日龄和90日龄前腔静脉采集血液样本,对重要的10项血液生理指标和7项血液生化指标进行测定,统计不同限饲水平下指标的差异,获得了巴马香猪血液生理生化指标的基础数据,建立了血液生理生化指标的参考范围和饲养标准。随后将课题组先期ENU诱变成功的7头F0代种公猪与野生型母猪交配,获得1101头后代即F1代理论上携带遗传突变基因的个体,再通过对其血液生理生化指标的测定,对血液指标值超过数据统计Mean±2SD的个体重复检测,对比正常巴马香猪血液学指标获得5头血液指标异常个体。结果如下：一、健康巴马香猪血液生理生化指标参考标准的建立我们通过对三个试验组之间巴马香猪血液指标的测定和分析可以发现,巴马香猪血液生化指标中ALT, TP, UREA和CREA指标值跟限饲水平呈正相关；而TCHOL和GLU指标值跟限饲水平呈负相关。血液生理指标中RBC, HGB, HCT, MCH和MCHC指标含量跟限饲水平成正相关；而PLT, MCV, RDW-SD和RDW-CV指标含量跟限饲水平成负相关。在50%限饲水平下,巴马香猪血液生理生化指标与对照组和20%限饲组之间存在明显差异。同时由于巴马香猪杂食性的特点,适当的添加青饲料符合其生长规律和身体需求,对建立巴马香猪血液生理生化标准参数有积极作用,因此在本次实验中,对巴马香猪进行20%限饲比未限饲和50%限饲更能获得稳定标准的巴马香猪血液生理生化指标,实验获得的20%限饲组巴马香猪血液生理生化指标可作为其标准参考范围。二、F1代血液生理生化指标异常个体将课题组先期诱变成功的F0代种公猪共7头与野生型母猪交配,获得1101头F1代个体,然后对血液生理生化指标进行严格筛选,对指标值超过统计量Mean±2SD的个体进行复检,结果显示65mg/kg剂量组F0代巴马香猪共配种获得464头F1代个体,未发现血液指标异常个体；85mg/kg剂量组F0代巴马香猪共产生637头F1代个体,其中发现血液生理指标异常个体2头,血液生化指标异常个体3头,血液指标突变率为7.85‰,表明在以血液指标为标准的表型筛选中,85mg/kg剂量组明显优于65mg/kg剂量组能获得更多血液指标异常个体。异常个体中006002(♂)初检和复检平均红细胞体积(MCV)值(71.5fL、72.3fL、70.8几),027098(♂)初检和复检血小板(PLT)值(779×109/L、791×109/L、783×109/L),006009(♂)初检和复检谷丙转氨酶(ALT)值(116u/L、131u/L、124u/L);006111(♀)初检和复检甘油三酯(TG)值(1.89mmol/L1.64mmol/L、1.21mmol/L)和尿素(UREA)值(12.3mmol/L、13.8mmol/L、10.0mmol/L)都高于数据统计Mean+2SD值,也高于正常巴马香猪血液生理生化指标参考值；027020(♂)初检和复检总蛋白(TP)值(38g/L、46g/L、40g/L)氐于数据统计Mean/2SD值,也低于正常巴马香猪血液生理生化指标参考值,初步可判断这5个个体可能为ENU诱变引起的血液指标显性突变个体。综上所述,本研究探讨了限饲对于巴马香猪血液指标的影响,为巴马香猪标准化的建立提供了饲养和营养参考,并建立了正常巴马香猪血液生理生化指标参考范围,然后通过对ENU诱变后F1代个体严格的血液生理生化指标测定和筛选,获得5头血液异常个体,为接下来显性突变个体的进一步鉴定研究以及ENU诱变下疾病遗传家系的建立提供了遗传材料。