一株海洋红藻生物活性初探

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化学农药在农业病原菌的防治中占有重要地位,但是化学农药的长期使用不但影响了农产品的品质,增强了病原菌的抗药性,而且其本身能够通过各种各样的方式扩散进入大气、土壤和水体等,产生的二次污染对人类生存环境构成严重威胁。因此,开发环境友好型天然抑菌活性物质是保证农业可持续发展的一大关键。海藻作为海洋资源的重要组成部分,蕴藏着多种多样结构新颖性能独特的化合物,在选择性的抑制某些病原微生物方面有着很好的效果。本文以青岛沿海常见的多管藻为研究对象,采用有机溶剂提取、萃取、梯度洗脱、薄板层析等方法,对其进行了初步的提取分离,并对得到的不同极性洗脱组分进行了高效液相色谱分析和抑菌活性分析,选择次级代谢产物丰富且具有抑菌活性的组分反复进行色谱分离纯化得到单体化合物,采用现代波谱技术进行鉴定了5个化合物结构,并对其进行进一步抑菌活性研究。主要结论如下:1.多管藻不同极性次级代谢组分的化学筛选和抑菌活性筛选:利用高效液相色谱法(HPLC)对各梯度洗脱组分(Fr1~Fr13)进行色谱分析,结果发现多管藻次级代谢产物丰富,其中组分Fr3~Fr7最为丰富;以4株细菌为供试菌对13个组分进行抑菌活性测试,结果表明多管藻中存在大量抑菌活性物质,组分Fr3~Fr7较其他组分抑菌效果更为明显。综上分析,本实验选择组分Fr3~Fr7作为后续研究对象。2.化合物的分离纯化:反复采用常规的硅胶柱层析、凝胶柱层析、制备薄层层析以及重结晶等分离方法从组分Fr3~Fr7分离纯化得到18个化合物,利用现代波谱技术确定了5个化合物结构。3.单体化合物的抑菌活性研究:以4株细菌为供试菌,采用滤纸片法,测定化合物ZP-1,2,3,8,10,11,16,17的抑菌活性,结果发现ZP-2和ZP-3抑菌活性较好,对3株或3株以上供试菌表现出抑制作用,对枯草芽孢杆菌、对金黄色葡萄球菌、对苏云金芽孢杆菌和对大肠埃希氏杆菌的抑菌圈分别为12mm、12mm(阳性对照为40mm),20mm、20mm(阳性对照为40mm),20mm、20mm(阳性对照为46mm),12mm、6mm(阳性对照为40mm),化合物ZP-10和ZP-17各仅对一种细菌有抑制效果,分别是苏云金芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌,抑菌圈分别为20mm和10mm;以5株农业病原真菌为供试菌,采用生长速率法,测定化合物ZP-2,8,10,11,16,17的抑菌活性,结果显示,化合物ZP-2对苹果腐烂病菌的抑制效果明显,抑制率为45.7%,对其余4株供试菌的抑制较弱,化合物ZP-17对5株供试菌都有一定的抑制活性,其中对白菜黑斑病菌的抑制率为46.7%,对葡萄白腐真菌的抑制率为56.7%;对化合物ZP-17进行了毒力学实验,分别测定了其对白菜黑斑病菌和葡萄白腐真菌的毒力方程和EC50。
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