论文部分内容阅读
背景与目的在全世界范围内,宫颈癌(cervical cancer,CC)是危害女性健康和生命的第三大恶性肿瘤,在所有癌症中所占比例为9.8%。每年全球新发病例约528000例,可导致约270000女性死亡。高危型人乳头状瘤病毒(high risk human papillomavirus,HR-HPV)感染与宫颈癌前疾病及恶性肿瘤的发生发展密切相关,是其形成的最主要危险因素,尤其是HPV 16、18型。子宫颈低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)和高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL)均属于子宫颈癌的癌前病变,其发生发展均与HPV感染有关。大部分学者认为不同程度的子宫颈病变感染的HPV亚型不同。HSIL与子宫颈癌的关系紧密,主要感染的HPV亚型与宫颈癌相同(HPV 16、18型)。而LSIL主要是由低危型人乳头状瘤病毒(low risk human papillomavirus,LR-HPV)感染引起的,如HPV6、11。然而,在临床实际工作中却发现LSIL中HR-HPV的感染率较高,甚至高于LR-HPV的感染率。本研究通过对HR-HPV的检测,对比分析LSIL和HSIL患者HR-HPV的感染亚型。同时采用HPV原位杂交法(in situ hybridization,ISH)对患者病变组织的蜡块标本进行HR-HPV检测,观察不同病变的HR-HPV感染部位及方式,重新探讨LSIL与HR-HPV的关系。资料与方法1研究对象:2015年10月~2016年12月在郑州大学人民医院病理科收集370例经病理组织学检查确诊为宫颈鳞状上皮内病变(squamous intraepithelial lesions,SIL)的组织石蜡标本。重新进行切片、苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后由两位有经验的病理医师进行读片,两人的意见一致则为最终的病理诊断结果,意见不一时由主任医师进行判读,确定最终诊断结果,其中LSIL 190例和HSIL180例。阅片过程采用双盲法进行。排除有子宫颈治疗史及合并其他妇科疾病的病例。患者年龄18~79岁,中位年龄38岁。本实验经医院伦理委员会审批通过。2方法:采用实时荧光定量PCR技术(罗氏Cobas4800检测系统)对370例宫颈病变石蜡组织样本进行HPV亚型检测,罗氏Cobas4800检测系统检测的亚型包括HPV 16、18及其他12种高危HPV(31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68)3类。随后应用HPV原位杂交技术对所有石蜡样本进行检测,观察阳性细胞所在的部位。本实验所有数据均采用统计软件SPSS17.0进行分析。采用χ~2检验、Fisher精确检验法进行数据分析,P<0.05表示有统计学意义。结果1 LSIL和HSIL中HR-HPV的检测结果:本实验对370例宫颈组织石蜡样本进行HR-HPV DNA检测及分析。HR-HPV总阳性率为95.9%(355/370),LSIL与HSIL中的HR-HPV阳性率分别为94.2%(179/190)、97.8%(176/180),差异无统计学意义(P=0.113)。LSIL、HSIL中,HPV 16、18的总阳性率分别为26.3%、56.7%;除HPV 16、18外的其他高危型HPV的总阳性率分别为79.5%、51.7%,差异均具有统计学意义(P<0.001)。2 LSIL和HSIL的HE染色特点:HE染色后镜下观察,LSIL镜下表现为表面上皮细胞分化良好,形成挖空细胞,细胞核出现轻度非典型性,绝大多数无异常核分裂象,病变主要位于上皮表层1/3。HSIL表现为细胞排列紊乱、极向不规则,出现大量异常核分裂象及不成熟细胞,病变细胞可扩展到上皮的中1/3层(CIN II)或表层1/3(CIN III),但主要位于上皮组织的中下2/3层。3 LSIL、HSIL中HPV原位杂交的检测结果:光镜下,HPV阳性呈现为棕黄色,且位于细胞核内。原位杂交结果显示:127例HR-HPV阳性的LSIL患者中,阳性细胞着色深且均匀,位于宫颈鳞状上皮组织表层1/3的有96例,位于上皮表层1/3及中层1/3的有31例,基底层及副基底层未见阳性细胞。HSIL中,阳性细胞分布较广泛,且着色较淡,但主要位于上皮组织的下2/3层。结论1 HR-HPV在LSIL中的阳性率高达94.2%,LSIL的发生、发展与HR-HPV感染相关,尤其是其他高危型HPV(除外HPV 16、18型)。2 HR-HPV感染在LSIL中主要位于鳞状上皮表层;在HSIL中分布较广,主要位于鳞状上皮下2/3层。HR-HPV感染部位不同可以形成LSIL与HSIL两种不同的病变。