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目的本研究探讨针刺对焦虑模型小鼠终纹床核(Bed nucleus of stria terminalis,BNST)内PACAP/PAC1-PKA-CREB通路信号分子的影响,拟揭示针刺抗焦虑的中枢PACAP作用机理。方法选用30只健康、清洁级、雄性C57BL/6J小鼠,依据行为学,采用分层随机设计,分为空白组、模型组、针刺组。依据文献建立慢性不可预知应激(Chronic unpredictable stress,CUS)焦虑小鼠模型。选取“神门”、“内关”进行针刺干预,每次针刺30min,每间隔5min捻转1次,捻转持续30s,左右交替,1次/2天,干预持续15天。运用高架十字迷宫结果评估各组小鼠焦虑样行为,利用酶联免疫法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ElISA)测定小鼠血浆皮质酮(Corticosterone,CORT)的含量,以免疫组化法检测小鼠BNST内垂体腺苷酸环化酶激活肽(Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP)及其受体(PAC1)、蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、环磷腺苷反应原件结合蛋白(cAMP-responsive element binding protein,CREB)的表达。结果1、行为学测试结果(1)OT%值:模型组小鼠在接受CUS造模后OT%值明显下降(P<0.05);针刺治疗后OT%值较模型组明显升高(P<0.05),且接近空白组小鼠水平。(2)OE%值:CUS造模后,模型组OE%值存在下降趋势,但无统计学差异(P>0.05);针刺后OE%值明显升高(P<0.05)。2、HPA轴相关指标血浆CORT,CUS造模后模型组血浆CORT水平显著升高(P<0.01);针刺干预后血浆CORT水平明显下降(P<0.01)。3、终纹床核PACAP/PAC1-PKA-CREB通路信号分子表达(1)PACAP:CUS造模后小鼠终纹床核内PACAP表达减少(P<0.01);针刺可显著提高终纹床核PACAP表达(P<0.01)。(2)PAC1:各组终纹床核内PAC1比较均无明显差异(P>0.05)。(3)PKA:CUS造模后小鼠终纹床核内PKA表达减少(P<0.01);针刺可提高终纹床核PKA表达(P<0.05)。(4)CREB:CUS造模后小鼠终纹床核内CREB表达减少(P<0.01);针刺可提高终纹床核CREB表达(P<0.05)。结论1、针刺“神门”、“内关”穴对CUS焦虑模型有较好的抗焦虑作用。2、激活CUS模型小鼠终纹床核内PACAP/PAC1-PKA-CREB信号通路、降低HPA轴活性,可能是针刺发挥抗焦虑效应的中枢重要途径之一。