目的:观察利用生物信息学方法筛选出的新型生物肽FK18在不同神经损伤性疾病模型中的神经保护作用,并深入研究其作用机制。方法:构建神经损伤的体内外模型,包括:谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤和NMDA诱导视网膜损伤的神经兴奋性损伤模型,以及OGD诱导SH-SY5Y细胞损伤和急性高眼压诱导视网膜损伤的缺血再灌注损伤模型。通过MTS试验、流式细胞技术、HE染色技术、TUNEL试验、荧光金逆行标记RGC细胞及电生理等方法检测神经细胞的活性、凋亡水平及视网膜结构功能的变化。通过western blot对Akt及Erk磷酸化水平及其下游相关凋亡蛋白水平的检测。将FK18溶解于不同溶剂中并置于不同温度下分别孵育不同时间,用HPLC技术检测FK18纯度以测定其稳定性。通过MTS试验、HE染色、电镜及电生理对FK18的体内外安全性进行评估。构建DR动物模型,通过TUNEL试验、免疫荧光技术、western blot以及电生理观察FK18对早期DR的保护作用。结果:在缺血再灌注损伤模型中,FK18能显著提高SH-SY5Y细胞的活性约12.24%,并减少其凋亡约6.52%;能有效缓解损伤后视网膜各层结构的紊乱,增加视网膜神经节细胞的数量约294个/mm2,并能显著改善损伤所致视觉功能的损害。在神经兴奋损伤模型中FK18也有类似的作用效果。FK18能有效提高FGFR1、Akt磷酸化水平,降低谷氨酸损伤所致Erk磷酸化水平的升高,并能进一步促进Bad磷酸化、提高Bcl-2/Bax比例、抑制细胞色素C从线粒体向细胞浆转移,最终导致caspase-3、caspase-9活化的减少,从而达到抑制凋亡的作用。FK18在多种溶剂中经历48小时不同温度的孵育后,仍有97%未被降解。FK18对SH-SY5Y细胞活性及视网膜结构功能均未见毒性作用。在DR模型中可观察到FK18能降低早期DR所致的视网膜凋亡、Müller细胞的活化以及视觉功能的异常。结论:生物肽FK18在神经兴奋性及缺血再灌注损伤模型中均能发挥神经保护作用,对早期DR所致视网膜损伤也有一定的改善作用。FK18的保护作用主要通过与FGFR1受体相作用实现,其抑制细胞凋亡的机制可能与调节Akt、Erk信号通路及其下游凋亡相关蛋白的表达水平有关。