论文部分内容阅读
本研究以嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)为出发菌种,筛选出高产细菌素性能的嗜酸乳酸菌,并对细菌素生物学特性及其分离纯化进行研究,然后以嗜酸乳杆菌分别发酵棉粕、豆粕,比较发酵后细菌素的活性。并研究嗜酸乳杆菌发酵棉粕饲料中无机离子及不同干燥和保存方法对细菌素活性的影响。本论文由以下四个试验组成。试验一:通过对实验室3株嗜酸乳杆菌菌株的抑菌特性检测,嗜酸乳杆菌J2的发酵液在排除有机酸和过氧化氢的干扰情况下,仍具有较高的抑菌活性,说明发酵液中还有其它活性物质的存在。用蛋白酶处理发酵液后抑菌活性明显下降,说明这种抑菌物质具有蛋白质性质,为细菌素的一种。试验二:采用琼脂扩散法,旨在对嗜酸乳杆菌所产细菌素的生物学特性进行研究。研究表明,该细菌素具有良好的热稳定性,可耐受121℃处理30min;有效pH范围(3.0~6.0);可不同程度的耐受多种有机溶剂;对多种蛋白水解酶敏感(胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,蛋白酶K和菠萝蛋白酶),但对胃蛋白酶敏感性低;抑菌谱广,对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性细菌以及大肠杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性细菌具有显著的抑制作用。试验三:旨在对嗜酸乳杆菌所产细菌素进行分离纯化研究。研究表明,采用60%的硫酸铵盐析、Sephadex G-50层析可得到初步纯化的细菌素,其比活力为386.3AU/mg,纯度提高了25.08倍,最终得率为26.99%;Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳估测出细菌素的分子量大小在7800-14400u之间。试验四:本试验将在原有研究基础上,进行嗜酸乳杆菌发酵棉粕、豆粕中细菌素活性的对比研究,并探索中无机离子及不同干燥和包装方法对细菌素活性的影响。结果表明:⑴利用嗜酸乳杆菌发酵不同底物对细菌素活性变化无显著影响。⑵底物微量元素添加量的优化结果为:X1(硫酸镁)0mg/kg、X2(柠檬酸三铵)275mg/kg、X3(硫酸锰)2.5mg/kg、X4(磷酸氢二钾)270mg/kg。⑶真空冷冻干燥的抑菌效果优于电热干燥(45℃、48h),差异不显著。⑷真空包装与普通包装相比,在延长细菌素的贮存时间具有优势。