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辣椒疫霉(Phytophthora capsici)是一种土壤传播的植物病害,属于鞭毛菌亚门的真菌。辣椒疫霉破坏性强,危害大,给我国农业生产带来非常严重的灾害损失。目前主要采用使用化学农药的方法防治该病害,往往会污染环境、使疫霉产生抗药性,农药残留增加,影响食物安全。生物防治技术可以控制辣椒疫霉的发生,不会造成环境污染,具有较广泛的应用前景。本论文进行辣椒疫霉生防菌的分离和筛选、生防菌的鉴定、生防效果测定和初步的应用研究。本研究采用平板稀释法进行菌株分离,从江苏省南京市紫金山林地以及六合区辣椒大棚里采集到的新鲜土壤中,分离得到60多个菌株。通过初筛得到6株对辣椒疫霉有不同程度抑制作用的菌株,复筛后发现菌株A14对P.capsici有较好的平板拮抗效果。菌株A14经过形态观察、培养特性观察、生理生化分析及16S rDNA序列分析,将菌株 A14 鉴定为Streptomyces sp.。菌株A14最适生长温度是28°C,最适pH为7.0,最适转速为160rpm。菌株A14生长的最佳碳源为淀粉,最佳氮源为牛肉膏。碳氮比例为5:1时,菌株A14生长最好。对菌株A14进行生防效果测定,结果表明,菌株A14对P.capsici抑制率在第7d达到最高,为63.64%。菌株A14的两种无菌发酵液对P.capsic菌丝生长都有很好的抑制作用,未加热无菌发酵液混合平板对P.capsici菌丝的最高抑制率为45.45%,加热的无菌发酵液混合平板对P.capsici菌丝的最高抑制率为43.64%,抑制效果差异不大,说明菌株A14无菌发酵液中拮抗性物质稳定。在显微镜下观察,受到菌株A14影响的P.capsici菌丝生长出现不同程度的畸形。菌株A14无菌发酵液传代稳定性较好,5代无菌发酵液对P.capsici的拮抗性没有明显的变化。菌株A14的LB培养液、黄豆粉液体培养基、NB培养液的无菌发酵液在对P.capsici的拮抗试验中,LB培养液无菌发酵液的拮抗作用最好。菌株A14无菌发酵液与P.capsici游动孢子液混合4h,7h,12h后,孢子萌发抑制率分别为84.26%、85.29%、86%,说明菌株A14无菌发酵液能有效抑制P.capsici游动孢子的萌发。在菌株A14发酵液离体实验中,浸泡过菌株A14发酵液的辣椒叶片能够有效抵御P.capsici的侵染,未浸泡过菌株A14发酵液的辣椒叶片受到P.capsici侵染时,侵染部位叶片上产生大片黑色病斑。菌株A14发酵液对P.capsici菌丝块的防治效果为32.23%,对P.capsici游动孢子的防治效果为49.04%。在盆栽实验中,提前3d用菌株A14发酵液灌根的辣椒幼苗对P.capsici有一定的抵抗能力,第10d时防效为40%。