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目的：①观察肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia MPP)患儿支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid BALF)中β防御素3(human beta-defensin-3,hBD-3)蛋白水平；②探讨不同病情程度MPP患儿BALF中hBD-3蛋白水平及其与BALF中MP 16SrRNA拷贝数,血清CRP之间的相互关系；③观察治疗前后MPP患儿BALF中hBD-3蛋白水平变化,来了解hBD-3在防御MP感染中的作用。方法：1.对象及分组：①选取2009年7月～2010年11月在我院住院肺炎患儿63例作为研究对象,均留有双份血清。运用颗粒凝集法(PA)检测肺炎MP特异性抗体,以双份血清MP抗体有4倍以上升高作为MP感染确诊标准。②根据MP感染确诊标准将肺炎患儿分为肺炎支原体肺炎(MPP)组36例和非MPP组27例；③根据难治性肺炎支原体肺炎诊断标准将MPP组分为难治性肺炎支原体肺炎(refractory Mycoplasma pneumoniae, RMPP)组即RMPP组22例和普通MPP组14例,所有入选患儿均行纤支镜支气管肺泡灌洗,并留有灌洗液。④其中MPP组中10例患儿留有治疗前和治疗7-14天后的双份灌洗液。⑤同时选取同期在我院支气管异物取出4周后来院复查的患儿12例作为对照组,均留有双份血清及灌洗液。2.通过纤维支气管镜镜检收集各组BALF并离心,其中MPP组中10例患儿在治疗前和治疗7-14天后进行两次纤维支气管镜镜检收集双份BALF。3.用ELISA方法检测]BALF上清hBD-3蛋白水平并用双缩脲法检测上清总蛋白含量。hBD-3与总蛋白含量比值代表BALF上清hBD-3蛋白量(pg/mg)。采用荧光实时定量PCR (FQ-PCR)检测BALF沉淀中MP 16SrRNA基因。4.观察MPP患儿BALF hBD-3蛋白水平与MP16 SrRNA基因的拷贝数及炎性指标CRP之间的关系。比较MPP患儿治疗前和治疗7-14天后BALF hBD-3蛋白水平及MP 16 SrRNA基因的拷贝数的变化。结果：1. MPP组、非MPP组与对照组hBD-3蛋白水平分别为227.99+ 37.25 pg/mg,232.17+17.40 pg/mg,340.98+19.6 pg/mg, MPP组及非MPP组hBD-3的表达量与对照组相比均显著降低(t值分别为15.31和10.11,P均<0.01)。MPP组hBD-3的蛋白水平与非MPP组体相比无显著升高(t值为0.49,P>0.05)。2.通过FQ-PCR对36份MPP组患儿BALF标本检测,结果均为阳性,拷贝数波动在3.80×104-4.70×108拷贝/ml,取对数后,计算其平均值及标准差为5.97±0.99。对照组以及非MPP组BALF标本39份,检测均为阴性,拷贝数均为0。3. MPP组患儿BALF中hBD-3蛋白水平与MP 16S rRNA基因的拷贝数呈负相关,相关系数为-0.73,P<0.05。4. MPP组患儿BALF中hBD-3蛋白水平与CRP呈负相关,相关系数为-0.56,P<0.05。MPP组患儿BALF中MP 16S rRNA基因的拷贝数与CRP呈高度正相关,其相关系数为0.81,P<0.05。5.在RMPP组中hBD-3蛋白水平为226.87±36.84(pg/mg)明显低于普通MPP组237.45±41.5(pg/mg)(t=17.78,P<0.01). RMPP组BALF中拷贝数波动在3.80×104-4.70×108,取对数后,计算其平均值及标准差为6.03±0.97。普通MPP组标本的拷贝数波动在4.10×104-1.30×108,取对数后,计算其平均值及标准差为5.86±1.05.RMPP组BALF中MP 16S rRNA拷贝数明显高于普通MPP组(t=15.97,P<0.01)。6. 10例MPP患儿治疗前后BALF中的hBD-3浓度分别为246.94±22.54 pg/mg,274.10±25.02 pg/mg.治疗后hBD-3浓度明显高于治疗前,差异有统计学意义(t=5.87 P<0.001)。10例MPP患儿治疗前的MP拷贝数波动在1.30×105-8.70×105,其对数平均值±标准差为5.51±0.25；治疗后的MP拷贝数波动在3.40×103-2.10×104拷贝/ml,其对数平均值±标准差为3.9±0.25。治疗后患者MP 16S rRNA基因拷贝数较治疗前显著下降(t=7.90 P<0.01)。结论：MPP患者BALF中p-防御素3蛋白水平较正常组降低,其降低程度与感染的MP数量以及患者的病情轻重相关,经过治疗β-防御素3蛋白水平回升,提示β-防御素3蛋白水平的降低与上皮细胞损伤程度有关,它可能参与MPP特别是难治性MPP的发病。