盐胁迫下杨树的生理响应及其胞外蛋白双向电泳分析

来源 :南京林业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:wodekechengsheji
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杨树是研究林木生理和利用基因工程方法进行遗传改良的理想模式植物。本研究以美洲黑杨杂种优良无性系南林895杨(Populus×euramericana cv.‘Nanlin895’)和南林无性系S-9杨组培苗为研究对象,研究NaCl胁迫对两种杨树保护酶系统和内源激素的影响以及研究NaCl胁迫对NL-895杨超微结构的影响,初步建立NL-895杨胞外蛋白的双向电泳体系,主要结论如下:1.100mmol/L NaCl胁迫处理后S-9杨上部叶片和下部叶片的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、类胡萝卜素c含量均高于NL-895杨,且叶片颜色深于NL-895杨,说明同等盐胁迫条件下S-9杨比NL-895杨更抗盐;S-9杨在NaCl胁迫处理后上部叶片、下部叶片及其根中产生的H2O2、可溶性蛋白、MDA含量均明显高于NL-895杨,但由于S-9杨自身SOD、POD、CAT、APX保护酶活性强于NL-895杨,进而使得S-9杨耐盐性高于NL-895杨。2.100mmol/L NaCl胁迫处理后的S-9杨上部叶片中ZT、IAA、iPA和ABA含量均高于NL-895杨,GA含量低于NL-895杨;而100mmol/LNaCl胁迫处理后的S-9杨下部叶片中ZT、GA、iPA和ABA含量均高于NL-895杨,这可能与S-9杨自身的特性有关——产生较多的内源激素以均衡外界胁迫造成的危害,因而比NL-895杨更具耐盐能力。3.100mmol/L NaCl胁迫处理后NL-895杨茎段横切面,与对照相比,破坏严重,木质部、韧皮部细胞排列不规则,木质部及中柱细胞稀薄,韧皮部细胞相对致密;皮层较薄,髓相对较小,细胞壁增厚明显且厚于对照,内有颗粒状或丝状物填充多而明显。100mmol/LNaCl胁迫处理后NL-895杨叶片的气孔张开度小于对照且数量减少;栅栏组织细胞排列相对致密多呈长梭状且部分细胞有破碎、孔腔较小、宽度窄、内含丝状物填充较多;海绵组织细胞排列较为规则且薄;类囊体片层排列不规则、无序;有叶绿体肿胀体、溶酶体的出现等。这些结构特征说明100mmol/L NaCl胁迫处理后NL-895杨茎段和叶片的形态及微观结构受到了较重的伤害。4.初步探讨NL-895杨叶片、茎段胞外蛋白的提取方法及其双向电泳技术。叶片胞外体蛋白采用盐提取法,茎段胞外体蛋白则采用真空渗透法。这些蛋白质点主要集中分布在pH4-7区域,叶片中蛋白质点分布于20-66KD之间,其中在20.1KD左右表达最强;而茎段胞外体蛋白质点分布于14-60KD之间,其中在31.0KD左右表达最强。
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