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目的:肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是一种由遗传因素、环境因素、衰老因素和表观遗传等相互作用导致肺泡上皮细胞和成纤维细胞发生深刻变化的疾病,病死率高,无有效的治疗药物。项目组前期药理活性筛选发现黄芪中的芒柄花素(Formononetin,FM)和丹参中的丹参素(Danshensu,DS)具有明显抗肺纤维化的作用。但是芒柄花素水溶性差、生物利用度低、显效慢;而丹参素化学稳定性差,易氧化、变色,从而限制了它们在临床上的应用。因此项目组运用天然产物化学技术制备得到新的化合物命名为芒柄花素-7-丹酚酸酯(简称FS),经合成后其稳定性及药理活性明显优于单体。其作用机制可能与抑制肺肌成纤维细胞的分化、增殖和迁移相关。研究肺纤维化发生的分子机制中发现长链非编码能够参与调控肌成纤维细胞。本项目拟研究FS的抗肺纤维化作用及其调控机制,将FS开发为治疗肺纤维化的新药物;同时为发掘lncITPF作为肺纤维化新的基因治疗靶点提供理论和实验数据的支持,具有重大的临床应用价值。方法:运用天然产物化学技术制备得到新的化合物命名为芒柄花素-7-丹酚酸酯(简称FS)。采用正辛醇-水分配体系对其进行溶解性及水溶液稳定性检测。体内、体外实验分别采用气管喷雾博莱霉素、TGFβ1诱导建立肺纤维化模型。实时无标记细胞分析技术(Real Time Cellular Analysis,RTCA)检测A549和L929细胞增殖和迁移能力。通过Cignal Finder Pathway System筛选FS抗肺纤维化过程中调控的信号通路,qRT-PCR技术检测MEF2c的表达变化趋势。质粒、siR-MEF2c转染A549和L929细胞,Western blot检测E-cadherin、vimentin、α-SMA、Snail的蛋白水平。结果:经合成后FS稳定性及药理活性明显优于单体。FS治疗可改善小鼠肺功能、减少细胞外基质沉积和肺泡结构的破坏;能够抑制肌成纤维细胞激活、迁移、胶原合成等。FS能够显著抑制转录因子MEF2c的转录活性。同时发现,hnRNP L介导lncITPF调控MEF2c的表达,lncITPF可能是潜在的药物治疗靶点。结论:FS通过hnRNP L降低lncITPF对MEF2c的转录活性,抑制上皮和肌成纤维细胞的激活、增殖和迁移能力,从而发挥抗肺纤维化的作用。