类整合素蛋白和微管蛋白在植物响应干旱胁迫中的作用

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植物在其生长过程中或多或少地会受到各种胁迫的影响,如干旱、低温和盐渍等。其中干旱是影响我国农作物生长,限制我国农作物产量的主要原因。因此,阐明植物对干旱胁迫的响应机制,提高植物的抗旱性,具有重要的意义。本试验以拟南芥(Arabidopsis thaliana)悬浮细胞和玉米(Zea maize L.)幼苗为试验材料,综合利用生物化学和细胞生物学等技术,研究了类整合素蛋白、细胞骨架及两者的相互作用在渗透胁迫诱导细胞合成ABA中的作用,结果表明:1、采用间接免疫荧光定位的方法,用人整合素β1亚基抗体在拟南芥悬浮细胞的细胞膜和玉米幼苗根细胞的细胞膜与核中均检测到类整合素蛋白的存在,且初步功能研究表明:类整合素蛋白参与细胞壁与细胞膜之间的粘连作用。渗透浓度为722mmol/kg的改良培养基中培养的拟南芥悬浮细胞比正常培养的细胞内源ABA含量高出2.4倍,而经RGD和胁迫同时培养的细胞内源ABA含量仅为正常培养细胞的1.5倍。同时,PEG和RGD处理玉米幼苗的根细胞与对照相比ABA含量上升了1倍,而去除RGD处理后再加PEG模拟干旱胁迫处理使ABA含量上升了6倍。这证实:类整合素蛋白参与了干旱胁迫信号转导过程,且此过程是一个可逆的过程。2、通过显微观察和荧光定位的方法,观察到细胞在遭受干旱胁迫时,其体内形成更多的周质微管以适应外界环境的变化;PEG处理玉米根细胞使ABA含量上升了3倍;单独黄草消处理和黄草消预处理后再用PEG模拟干旱处理都使细胞内ABA含量上升了将近1倍;而先用PEG后用黄草消处理使细胞内的ABA含量与对照相比上升了4倍。RT-PCR的实验结果显示:PEG处理的玉米根中Vp14基因的表达量明显增加;黄草消处理和黄草消预处理后再用PEG处理也使Vp14表达量较对照有所增加;而先用PEG处理后再用黄草消处理却使Vp14表达量增加得更为显著。用紫杉醇和PEG互作处理后得出了类似的结果,说明微管参与了干旱胁迫信号转导过程,且不管是解聚还是稳定,只要破坏微管的动态平衡就能导致细胞合成ABA。3、通过荧光共定位发现,类整合素蛋白在质膜内侧与微管相连,但是单独
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