鞘氨醇激酶1在小鼠早期妊娠子宫中的表达

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鞘氨醇类代谢产物,在调节细胞活动中发挥重要作用,维持鞘脂代谢的平衡,对细胞的生长和发育具有至关重要的作用。鞘氨醇激酶(Sphingosine kinase;SK)是保持鞘脂平衡的重要调节因子,在细胞的增殖、迁移、侵袭以及血管生成中起着重要作用。SK1具有促进细胞生存和增殖的功能。胚胎着床过程中主要涉及细胞增殖、迁移和血管生成,因此SK1可能参与胚胎着床过程。本研究通过建立小鼠早期正常妊娠模型、假孕模型、人工蜕膜化模型、延迟着床和激活着床模型,采用免疫荧光的方法检测SK1在小鼠各模型子宫组织中的定位表达情况,应用Western blot的方法检测小鼠正常妊娠模型中SK1的表达量。在体外诱导小鼠子宫基质细胞发生蜕膜化,通过实时定量PCR的方法,检测SK1 mRNA在体外蜕膜化细胞中的表达量,进一步确定SK1的表达与蜕膜化的相关性。免疫荧光结果显示,在小鼠早期妊娠模型中,妊娠1~4天时SK1主要在基质区域表达,而子宫腔上皮和腺上皮无表达,妊娠5~8天时SK1主要表达在次级蜕膜区域。亚细胞定位显示SK1在蜕膜细胞的细胞质中表达。在小鼠假孕妊娠模型中,SK1主要表达在基质区域,假孕第5天的表达低于正常妊娠第5天的表达。在延迟着床模型和激活着床模型中同样检测到SK1的表达,且分别与正常妊娠第4天和第5天的表达情况相似。在人工蜕膜化模型和体外诱导的小鼠子宫蜕膜化细胞中均检测到SK1的表达。Western blot结果显示SK1在妊娠5~8的表达量逐渐升高。实时定量PCR结果显示,培养72 h和96 h的基质细胞中,发生蜕膜化的细胞中SK1的表达量高于其对照组。综上实验结果,SK1在小鼠子宫中的表达呈现时空特异性的变化,SK1小鼠早期妊娠过程中的表达与活化胚泡相关,在体内及体外实验中均与蜕膜化相关,表明SK1参与小鼠早期妊娠的胚胎着床过程。
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