研究背景:目前认为表皮囊肿起源于破坏的毛囊结构或外伤植入性上皮,未发炎时通常无症状,继发感染可引起疼痛等不适,极少数损害可发生鳞状细胞癌或基底细胞癌。临床工作中我们发现部分表皮囊肿的HE切片中可以见到近腔侧面的囊壁细胞内透明角质颗粒明显增多、粗大,有空泡样细胞及大而圆的角化不全细胞核等HPV感染的组织学特点,由此猜测HPV感染可能与表皮囊肿的形成有关。文献检索发现有许多关于HPV57、60与掌跖部位表皮囊肿形成有关的报道。我们发现具有HPV感染组织学特征的表皮囊肿均为非掌跖部位,由此推测非掌跖部位的表皮囊肿可能也与HPV感染有关。人类乳头瘤病毒(HPV)是一类侵犯人类皮肤和粘膜的无包膜的双链DNA病毒。目前已经鉴定了 170多种人类乳头瘤病毒,已证实其感染可引起多种疾病,包括疣、疣状表皮发育不良、鲍温样丘疹病、尖锐湿疣及多种良、恶性肿瘤,如脂溢性角化病、日光性角化病、鳞状细胞癌、基底细胞癌、宫颈癌、卵巢肿瘤等。HPV主要分为皮肤型、粘膜型,该病毒容易感染皮肤和黏膜的上皮,可以通过微小损伤侵入上皮,潜伏于上皮的基底层细胞,待时机成熟后进入角质形成细胞的细胞核内进行增殖,形成空泡样细胞,该细胞在诊断HPV感染时具有重要的意义。目前用于检测HPV的方法很多,免疫组织化学法、原位杂交法、PCR等检测方法相对灵敏,可以检测出低水平的病毒感染量。实验目的:(1)检测表皮囊肿中HPV的存在情况及其相关分型;(2)扩展HPV感染引起的疾病谱;(3)探讨HPV感染是否与表皮囊肿的发生有关,进一步明确表皮囊肿的形成原因及HPV感染引起多种疾病的机制。材料与方法:(1)收集山东省立医院皮肤科门诊经临床及组织病理确诊为表皮囊肿的样本57例(其中8例同时留取新鲜组织)、正常皮肤30例为对照组。(2)所有标本进行免疫组织化学染色观察HPV感染的情况。(3)通过石蜡组织块及新鲜组织DNA提取试剂盒提取DNA,PCR引物设计来源于文献原文,对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析及利用人乳头瘤病毒核酸分型检测试剂盒对本次实验所提取的DNA进行HPV分型检测,分析表皮囊肿中HPV的感染率及HPV亚型。(4)统计所得数据,用SPSS22.0软件进行统计学分析,计算出P值。实验结果:(1)免疫组织化学(IHC)结果示:57例表皮囊肿的石蜡组织切片中无空泡样细胞的32例样本IHC阴性,25例有空泡样细胞的样本中2例强阳性(+++),4例中度阳性(++),5例弱阳性(+)。阳性病例中囊壁细胞出现典型细胞核着色的阳性细胞主要分布在棘层,少数分布在颗粒层。11例IHC阳性的病例中9例位于头面部,2例位于躯干部,病例组HPV总阳性率为21%(11/57),占有空泡细胞等HPV感染特征的病例44%(11/25),而正常对照皮肤呈阴性,病例组与对照组比较差别具有显著性(P<0.05)。(2)聚合酶链式反应(PCR):57例表皮囊肿组织中有1例出现HPV 1、2、3、4、7、10、57DNA阳性,但是条带欠佳,余表皮囊肿及正常对照组皮肤呈阴性。HPV 核酸分型检测试剂盒包括 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、6、11、42、43、44、53、81、73、82 共 23 个分型,所有样本在荧光PCR仪上显示结果均为阴性。具有HPV感染组织学特点的表皮囊肿病例组与对照组比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论:HPV感染与非掌跖部位的表皮囊肿的发生可能具有相关性,具体分型有待进一步求证。PCR及IHC对该实验样本可能不敏感。