沙地云杉（Picea mongolica）为松科（Pinaceae）云杉属（Picea）常绿乔木,是我国特有针叶树种之一。由于受到树体生长状况、外植体材料采集季节、株系基因型差异、组织培养周期长和遗传转化方法的成熟度低等因素制约,国内云杉属树种的再生及遗传转化体系并不完善。本研究以沙地云杉成熟胚、无菌苗针叶和茎段为外植体,研究不同基本培养基、不同生长调节剂种类及浓度对其愈伤组织诱导、增殖的影响。在此基础上,以沙地云杉愈伤组织为受体材料,筛选了GUS报告基因的遗传转化条件,并通过农杆菌介导法对愈伤组织进行了Pm LEA25基因遗传转化,获得了阳性愈伤组织。研究为沙地云杉再生体系建立奠定基础,同时为云杉属针叶树种遗传转化体系建立提供理论与技术参考。主要研究结果如下:（1）沙地云杉愈伤组织的诱导:以成熟胚为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基组合为:LM（Litvay Medium）+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,诱导率达96%;愈伤组织增殖最佳培养基组合为:1/2 LM+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,增殖倍数达3.13;以无菌苗针叶为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基组合为:DCR+6-BA2.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1,诱导率达80%。以无菌苗茎段为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基组合为:DCR+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,诱导率达95.33%。愈伤组织增殖最佳培养基组合为:DCR+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1,增殖倍数达5.34。不同外植体诱导愈伤组织能力为:成熟胚＞茎段＞针叶。（2）以沙地云杉愈伤组织为受体,筛选了报告基因GUS的最佳遗传转化条件,结果表明:农杆菌介导法转化沙地云杉成熟胚愈伤时OD600=0.5,时间以10 min为最佳,遗传转化效率高达80%。（3）构建沙地云杉Pm LEA25过表达载体,采用农杆菌侵染法获得过表达沙地云杉非胚性愈伤组织,分别对非转基因型与过表达愈伤组织进行200 m M Na Cl胁迫处理,结果发现Pm LEA25过表达沙地云杉成熟胚愈伤组织鲜重均明显高于非转基因型,证明Pm LEA25可显著提高沙地云杉的耐盐性。