P2X6受体和催产素在肠神经系统中的分布,共存,及其神经元种类的鉴定

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胃肠神经系统是自主神经系统的一个分支,具有控制消化系统的功能。胃肠道神经系统包括来自副交感迷走神经背侧运动核,副交感神经骶核和椎前交感神经节的外源性神经和肠道自身的内源性神经,它们组成一个整体控制一整套消化系统。之所以称胃肠神经系统是独立的神经系统,是因为,胃肠道系统在失去中枢支配以后仍然可以独立地产生反射活动。这些反射活动主要是由肠壁内的神经元所介导调控的。在胃肠道肠壁内存在着数种神经元,包括内源性初级传入神经元(类似于感觉神经元),中间神经元和运动神经元。这些神经元主要存在于两种肠神经丛中,肌间神经丛和粘膜下神经丛。这些神经元相互联系,组成一个结构和功能的整体。其中,神经递质和神经肽在调控肠道神经系统生理功能方面起到了非常重要的作用。但对于多种神经递质(如ATP)和神经肽(如OT)在肠神经系统中的分布还不是很清楚。因此深入研究ATP和OT在肠神经系统中的分布对于深入认识胃肠神经系统的作用机制具有比较重要的意义。在分子、细胞、系统水平的研究证实细胞外ATP作为重要的信号分子作用于嘌呤能受体参与众多的生理和病理过程。P2X受体是ATP门控嘌呤能受体,在哺乳动物中由7种亚型(P2X1-7)组成。P2X受体广泛存在于在胃肠神经系统中。P2X2,P2X3,P2X5和P2X7受体存在于肌间神经丛中,P2X2,P2X3和P2X7受体存在于粘膜下神经丛中,这些嘌呤能受体可能表达在胃肠道神经丛中内源性初级传入神经元,中间神经元和运动神经元上从而对胃肠道的感觉,神经传导以及蠕动起到各种各样的调节作用。本部分研究主要利用免疫荧光组织化学技术系统性地研究P2X4和P2X6受体在大鼠胃肠道中的表达。结果显示P2X6受体广泛表达于粘膜下神经丛和肌间神经丛。在肌间神经丛中,P2X6受体主要表达在DogielⅡ样大型神经元中,这些P2X6受体阳性神经元同样表达内源性感觉神经元的标志物——calbindin-28k,calretinin和NeuN(神经元胞核)。在粘膜下神经丛中,所有calbindin-28k,calretinin和NeuN阳性细胞都表达P2X6。P2X4受体不表达在大鼠胃肠道的神经元中而表达在巨噬细胞中。已有的研究发现P2X6不形成同聚体,而是通过与P2X2或者P2X4形成异聚体来发挥作用。因此,我们的结果提示在内源性感觉神经元中,ATP有可能通过作用于P2X6和P2X2形成的异聚体来调节这些神经元的生理功能。一些早先的研究显示,催产素不仅具有催乳和促分娩作用,在肠道中,催乳素还具有刺激或抑制胃肠道功能的作用。多年的研究成果已经部分揭示了催产素在胃肠道上分布的相关信息,但是对于催产素在胃肠道中分布的系统性形态学证据还比较缺乏。在我们第二部分的工作中,我们研究了催产素阳性神经元在豚鼠胃肠道中的分布状况和免疫染色强度。研究结果证明催产素阳性神经元广泛分布在豚鼠胃肠道中。在胃体,空肠,回肠,近段和远端结肠肠肌层神经丛中,分别有大约3%,13%,17%,15%和10%的节细胞呈催产素免疫阳性,在空肠,回肠,近段和远端结肠粘膜下神经丛中,分别有大约36%,40%,52%和56%的节细胞呈催产素免疫阳性。在肠肌层神经丛中,催产素特异性地表达在Calbindin 28K阳性的内源性肠道传入神经元中。在粘膜下神经丛中,催产素表达在非胆碱能促分泌神经元中,这些神经元的标志物是VIP。在内环肌层中催产素阳性神经元纤维可能来自于肌间神经丛中催产素阳性的神经元,而粘膜中催产素阳性神经元纤维可能来自于肌间神经丛和粘膜下神经丛中催产素阳性的神经元。这些数据提示催产素在消化道中可能通过作用内环肌来调节胃肠道的运动,同时调节水与电解质吸收和分泌的平衡。我们进一步的工作研究发现,P2X6可以和OT共存在某些神经元中。这些结果提示两种神经递质或神经肽可能存在一定的相互作用,ATP可能通过作用于P2X6受体调节催产素的分泌,从而影响胃肠道的功能。本工作首次详细研究了嘌呤能受体P2X6和神经肽OT在大鼠和豚鼠胃肠神经系统中的分布,为进一步深入探讨它们的功能打下基础,ATP,可能通过作用于P2X6与P2X2形成的异聚体组合来参与调节这些神经元的生理功能,在豚鼠肠道中,催产素可能通过作用于内环肌调节胃肠道运动并调节水与电解质吸收和分泌的平衡。
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