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农作物副产品如秸秆等含有很高的纤维素成分,是一种潜在的自然资源,在全球资源危机的今天,利用其大力发展畜牧业,不仅可以充分利用资源,还能避免因秸秆燃烧对生态环境造成的污染。利用纤维素酶分解纤维素是利用纤维素资源的有效手段之一,目前产纤维素酶菌株多分离自反刍动物瘤胃液、堆肥、土壤等,所得降解纤维素能力较强的菌株多为厌氧菌株,由于培养条件严格,在生产中的应用得到限制。本研究以竹鼠肠道内容物作为微生物来源,从中分离筛选出优良的兼性厌氧产纤维素酶菌株,为最大限度开发利用纤维素资源奠定基础,同时促进新能源、食品、以及畜牧业等相关行业的快速发展。本研究主要包括以下四部分内容:试验一:通过严格厌氧结合需氧培养,以羧甲基纤维素钠为唯一碳源对竹鼠肠道内容物进行涂布培养,初步分离出具有降解纤维素能力的菌株后,结合刚果红染色以及酶活测定复筛出所需目的菌株。试验结果显示,从竹鼠回肠、盲肠、结肠共得到17株菌株,根据菌株形态筛选出7株疑似纤维素降解菌,分别为来自竹鼠回肠的H-1、H-2菌株;盲肠的M-1、M-2、M-3菌株;结肠的J-1、J-2菌株;结合刚果红染色法所得到的透明圈与菌落直径比,测定其发酵液酶活后,显示M-2、M-3酶活较高,分别为0.5029U/mL、0.4874U/mL。试验二:将来自盲肠的M-2、M-3菌株作为目的菌株,通过形态学观察、革兰氏染色观察,菌株生理生化实验,以及分子生物学鉴定确定该菌的种或属。试验结果证明:来自于竹鼠盲肠的M-2、M-3菌株的形态学特征观察结果,结合生理生化实验,并分别利用PCR对其16SrDNA序列扩增,经过克隆、测序后,在Genbank数据库里面BLAST结果表明,M-2属于肠杆菌科的沙雷氏菌属(Serratia),M-3菌株确定为肺炎克伯雷氏菌(Klebsiella pneumoniae)。试验三:挑选酶活相对较高的来自盲肠的M-2菌株作为目的菌株,测定不同发酵时间、碳源、氮源、接种量、温度及初始pH值对菌株M-2产酶活性的影响,对其产酶性质进行研究。试验结果表明:这6种因素对菌株产酶均有显著影响,并确定菌株最适产酶培养条件为:在菌株以葡萄糖为碳源,以酵母粉为氮源,初始pH7,40℃摇瓶培养24h,最佳接种量为4%时,能够表现出最大的产酶活性。