论文部分内容阅读
本研究采用SD大鼠脂肪组织的基质血管细胞分离培养大鼠的前体脂肪细胞。探讨了使前体脂肪细胞达到良好的增殖与分化状态的培养液条件。在此基础上,应用油红0染色提取法、形态学观察、MTT比色、流式细胞术等方法,检测了中药成分大黄素和大黄酸对大鼠前体脂肪细胞分化、增殖和凋亡的影响,并初步探讨了其作用机制。为进一步应用大黄素和大黄酸药剂或添加剂调控人和动物的体脂沉积提供了依据。从而有望改善中药时效性,发挥其多层次、多靶位点的药理作用。本研究包含以下几方面内容:
1、研究使大鼠前体脂肪细胞达到良好增殖与分化状态的培养液培养液条件。通过设置养分起始浓度不同的四类培养液,分别添加一定浓度梯度的L-Gln,培养大鼠前体脂肪细胞。采用形态学观察、MTT比色、油红O染色提取法,比较各组细胞形态以及增殖与分化的效果。
2、研究大黄素和大黄酸对大鼠前体脂肪细胞分化的影响。采用油红O染色提取法、形态学观察法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化以及前体脂肪细胞充脂率、充脂程度及形态变化。
3、研究大黄素和大黄酸对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响。采用MTT比色法、流式细胞术分别检测大黄素和大黄酸作用下,前体脂肪细胞增殖力、细胞周期的变化以及细胞凋亡情况。
以上研究得出如下结论:一,及时满足培养液中L-Gln的需求量,可使前体脂肪细胞达到较好的增殖与分化状态。二,大黄素和大黄酸均可剂量和时间依赖性抑制前体脂肪细胞增殖与分化,具有潜在的减肥降脂作用,但二者的作用机制可能不同。