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MicroRNAs (miRNAs)是一类小分子非编码RNA(大约22个核苷酸),主要在RNA沉默和基因的转录后调控过程中发挥功能。通常,一个miRNA通过碱基配对方式与位于mRNA 3’端非翻译区的互补序列结合,进而导致mRNA的降解或者翻译抑制。一一个miRNA可能调节数百个mRNA,同时多个miRNA也可能靶向同一个mRNA,这种特性赋予了miRNA作为重要调节因子的潜能。乳腺癌中10号染色体长臂上高频基因组拷贝数缺失预示了这一区域中肿瘤抑制基因的存在。为了筛选乳腺癌10号染色体长臂上可能缺失的miRNA,我们采集了20例乳腺癌组织和4例良性乳腺疾病组织,用基因组实时定量PCR检测了由miRbase 18.0数据库预测位于这个区域中已知45个miRNA的DNA拷贝数,miR-1254作为缺失频率最高(85%样本缺失)的miRNA被鉴定出来。我们接下来重点探究了miR-1254在ER+乳腺癌细胞中的功能。三条线索证明了miR-1254在乳腺癌中行使着肿瘤抑制功能,第一：miR-1254抑制乳腺癌细胞增殖促进细胞凋亡；第二：miR-1254抑制乳腺癌上皮细胞间充质样转化(EMT)过程及干细胞比例；第三：小鼠移植瘤实验表明,抑制miR-1254在体内可以增强乳腺癌细胞的肿瘤起始能力和原位侵袭、远端转移能力。上皮细胞间充质样转化和干细胞比例的增加往往是ER+乳腺癌细胞对雌激素依赖性降低的标志。与论文之前的结论一致,抑制miR-1254导致ER+乳腺癌细胞生长不再依赖雌激素以及体内体外明显的他莫昔芬抗性。可以想见,在他莫昔芬抗性细胞中恢复miR-1254的表达可以恢复细胞对他莫昔芬的敏感性,并且降低细胞的转移能力和干细胞比例。为了确定miR-1254是通过怎样的机制来行使肿瘤抑制因子功能的,我们首先采用miRanda和TargetScan预测了miR-1254可能的mRNA潜在靶点,进一步的基因聚类分析帮助我们缩小靶点范围并鉴定出NCOA1, NCOA3, EGFR, ERBB2和SNAI1这五个在乳腺癌他莫昔芬抗性和／或上皮细胞间充质样转换过程中已充分报道的基因可能是miR-1254的潜在靶点。进一步的荧光报告、蛋白免疫印记和免疫组织化学实验共同确定了这五个基因确实是miR-1254的靶点。总的来说,本论文证明了miR-1254在乳腺癌中通过同时调控ER/EGFR/HER2信号通路来实现肿瘤抑制因子的功能,并预示了miR-1254在抗肿瘤及乳腺癌他莫昔芬抗性中的广泛应用前景。