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目的: 《素问·评热论》曰:“邪之所凑,其气必虚”。中医学认为阳虚是指机体阳气偏衰、正气不足、阴阳失调,从而呈现一系列机能衰退、代谢减弱的病理状态。近20年的研究发现,阳虚的主要内在实质特征之一是机体免疫系统功能低下或紊乱。机体的免疫功能主要由细胞免疫和体液免疫两大部分共同协调完成。细胞免疫中具有代表意义的T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值及体液免疫中具有重要意义的细胞因子白细胞介素-2(Interleukin-2)水平是反映机体免疫系统功能状况的重要指标。大量资料表明,防治阳虚证的机制、机理与良性调整CD4+/CD8+比值及IL-2的水平有密切的关系。目前,国内外对中医疗法防治免疫系统功能低下或紊乱类疾病的实验研究多集中在针灸、中药、方剂等方面,而推拿科研在此方面尚处于起步阶段,但大量临床观察却显示,推拿疗法防治免疫系统功能低下或紊乱类疾病具有良好的实际效果,且乐于被广大患者接受并受到普遍欢迎,具有很大发展潜力。因此,大力加强推拿疗法防治这类疾病的免疫学基础研究尤显重要,其研究成果将有助于更好地指导临床实践。本课题通过自制小型实验动物专用机械式推拿治疗仪模拟中医推拿振动类手法量化刺激阳虚模型大鼠足三里、肾俞二穴,观察其对阳虚模型大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值及细胞因子IL-2水平变化的影响,初步探讨推拿疗法调节免疫系统功能的作用机制,并为临床运用推拿疗法防治以免疫系统功能低下或紊乱为主要内在实质特征的阳虚证提供科学的实验依据和理论指导。 方法: 选用SPF级Wister大鼠为实验对象,均为6-7周龄,体重230-280g,雌雄兼用分养。参照文献,将Wister大鼠每天每鼠按照3mg/100g体重标准,进行醋酸泼尼松注射液(AHP)大腿肌肉注射,连续5天,建立阳虚大鼠模型。造模成功后,随机将阳虚模型大鼠分为三组,每组10只,按组分别使用生理盐水灌服(每天每鼠用注射器向其胃内灌服生理盐水2ml,每天1次)、黄芪注射液肌肉注射(每天每鼠按照1g/100g体重标准行大腿肌肉黄芪注射液注射,每天1次)、足三里及肾俞穴量化推拿(每天每鼠用自制小型实验动物专用机械式推拿治疗仪在其选穴上进行量化推拿,每天2次,每次每穴10min)三种方法同时进行实验。持续2周后,通过与生理盐水灌服组比较,使用流式细胞术和ELISA(双抗体夹心)法,分别观察足三里、肾俞穴位量化推拿法及黄芪注射液肌肉注射法对阳虚模型大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值和细胞因子IL-2水平变化的影响,并采用统计学F、q检验方法进行科学分析,比较穴位量化推拿法与黄芪注射液肌肉注射法在影响阳虚模型大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值和细胞因子IL-2水平变化方面是否有统计意义上的差异。 结果: 1.阳虚模型大鼠经过足三里、肾俞穴量化推拿治疗后,与生理盐水灌服组比较,其外周血T淋巴细胞亚群中CD4+百分比例、CD4+/CD8+比值升高,而CD8+百分比例下降(P<0.01);湖北中医学2002级硕士研究生学位i比较阳虚模型大鼠经过足三里、肾俞穴量化推拿治疗后,与生理盐水灌服组絮麒嘿条 L一2水平明显上升(P<0 .01); 茂注射液肌肉注射后,与生理盐水灌服组比较,其外周血T淋巴细胞亚群中CD犷百分比例、CD4‘/CDs+比值升高,而CDs+百分比例下降(P<0.01):4.阳虚模型大鼠经过黄茂注射液肌肉注射后,与生理盐水灌服组比较,其外周皿甲细肥囚寸几一Z水带明显上汁叹F<0 .UI少; 5.足三里、肾俞穴量化推拿治疗法与黄茂注射液肌肉注射法在提高阳虚模型大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD犷/CDs+比值和细胞因子IL一2的水平方面均无显著差异(P>0.05)o结论: 量化推拿足三里、肾俞穴,能使阳虚模型大鼠外周血T淋巴细胞亚群中CD4+百分比例、cD.+/CDs+比值显著升高,CDs+百分比例下降;同时能使其外周血中细胞因子IL一2水平明显上升,因此改善了阳虚证机体低下的免疫功能,纠正了阳虚证机体免疫系统紊乱的情况,从而为临床运用推拿疗法防治以免疫系统功能低下或紊乱为主要内在实质特征的阳虚证提供了科学的实验依据和理论指导。主题词:阳虚证免疫T淋巴细胞亚群白细胞介素一2推拿足三里肾俞