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本文主要从以下几方面进行论述： 第一部分 通心络通过neuregulin-1/ErbB信号通路促进人心脏微血管内皮细胞功能 目的:心脏微血管内皮结构和功能的完整对心肌有效的血流灌注和正常功能的维持发挥着重要作用。神经调节蛋白-1(neuregulin-1，NRG-1)是表皮生长因子家族的一员，其特异性表达于心脏微血管内皮细胞和心内膜。NRG-1通过与心肌细胞表面ErbB受体结合，激活下游通路，对心脏发育、代谢等过程发挥着重要的调节作用。然而，近些年来，其表达的组织学特异性产生了争议，其对心脏微血管内皮的自分泌作用也尚未阐明。通心络(tongxinluo，TXL)是一种具有内皮保护功能的复方中药，广泛应用于心脑血管疾病的治疗。本研究旨在探索NRG-1自分泌对心脏微血管内皮细胞功能的影响以及TXL的调节作用。 方法:在大鼠和人的心脏标本中，采用NRG-1与vWF（内皮标记）免疫荧光共染色，验证NRG-1表达的组织学特异性。以慢病毒为载体，将NRG-1基因shRNA转染人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cells，HCMECs)，抑制NRG-1基因的表达。CCK-8法检测HCMECs体外增殖活力，划痕试验检测细胞体外迁移能力，以缺氧4h/复氧2h为损伤模型，细胞存活实验检测细胞抗损伤能力，TUNEL染色法检测细胞凋亡水平。给予通心络溶液(800μg/ml)干预，检测其对HCMECs增殖、迁移和抗损伤能力的影响，以及NRG-1基因的表达被抑制后该影响的变化。 结果:NRG-1特异性的表达于心脏微血管内皮细胞和心内膜，大的冠脉内皮、静脉内皮均不表达。NRG-1自分泌显著促进HCMECs体外增殖、迁移和抗损伤能力(p＜0.05），外源性补充重组人neuregulin-1(rhNRG-1)能进一步加强该作用(p＜0.05)。通心络能显著促进HCMECs体外增殖、迁移和抗损伤能力(p＜0.05)，当neuregulin-1基因的表达被抑制后，该作用被部分消除。 结论:上述结果表明，neuregulin-1特异性地表达于心脏微血管内皮和心内膜，通心络部分通过neuregulin-1/ErbB信号通路促进心脏微血管内皮细胞功能。 第二部分 通心络通过neuregulin-1/ErbB信号通路减轻大鼠急性心肌梗死再灌后心肌无再流和再灌注损伤 目的:心肌无再流和再灌注损伤是急性心肌梗死(acute myocardialinfarction，AMI)再灌注治疗时代的两大难题。既往研究表明，具有微血管内皮保护功能的复方中药通心络(tongxinluo，TXL)能有效减轻AMI再灌后心肌无再流和再灌注损伤，而具体机制尚未阐明。神经调节蛋白-1(neuregulin-1)特异性表达于心脏微血管内皮细胞及心内膜，与心肌细胞表面ErbB受体结合后，激活下游信号通路，对心肌缺血再灌注损伤具有明确的保护作用。因此，本研究旨在探索通心络对大鼠AMI再灌后心肌无再流和再灌注损伤的保护作用是否与neuregulin-1/ErbB信号通路有关，并对心肌无再流发生的病理机制作进一步探索。 方法:开胸结扎大鼠心脏左前降支(LAD)1小时，松开24小时或4周，分别建立AMI再灌注急性期模型和慢性期模型。结扎LAD前2h经颈静脉注射neuregulin-1中和抗体抑制neuregulin-1/ErbB信号通路;结扎LAD前15 min给予通心络灌胃。病理染色测定心肌缺血危险区面积(area at risk，AAR)、心肌无再流面积(area of no-reflow, ANR)、心肌坏死面积(area of necrosis，AN);心脏超声和血流动力学检查评价心功能;病理染色和透射电镜观察心肌组织病理变化;ELISA和Real-time PCR分别检测neuregulin-1、VE-cadherin等在心脏各区域的表达。 结果:通心络显著促进neuregulin-1的分泌(p＜0.05)，减轻大鼠AMI再灌后心肌无再流和再灌注损伤，缩小梗死面积，改善急性期和远期心功能。Neuregulin-1中和抗体抑制neuregulin-1/ErbB信号通路后，通心络的保护作用被部分抑制(p＜0.05)。心肌无再流区微血管内皮间连接严重受损，大量红细胞向组织间隙浸润。 结论:通心络部分通过neuregulin-1/ErbB信号通路减轻大鼠AMI再灌后心肌无再流和再灌注损伤。微血管内皮屏障受损是心肌无再流发生的重要机制。