CD4+CD25+CD127Low调节性T细胞与相关性疾病的临床应用研究

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目的:1.观察外周血CD4+CD25+CD127Low调节性T细胞(Treg)在健康人不同性别与年龄段之间水平表达情况,建立本实验室健康人外周血中CD4+CD25+CD127LowTreg细胞的参考数据;2.将这一数据应用于临床原发性肝癌患者、肝肾移植患者、脓毒血症患者及炎症病人,观察这一指标与正常人群之间水平变化的比较;分析原发性肝癌患者治疗前后、肝肾移植患者移植前后、脓毒血症治疗过程中的水平变化,期望能够对肝癌、肝肾移植、脓毒血症临床治疗、病程及判断预后提供有价值、有诊断意义的参考数据;3.检测TGF-β1、IL-10的浓度,观察CD4+CD25+CD127LowTreg细胞的百分率与以上两种细胞因子浓度的关系。方法:1.正常人组共180例:收集健康体检成年人EDTA-K3抗凝外周静脉血,运用流式细胞术分析CD4+细胞中表达CD25+CD127Low细胞的百分率,以SPSS13.0软件进行统计学分析;2.疾病组共59例:原发性肝癌组治疗前30例,选用30例中20例做治疗前后观察;肝肾器官移植组15例,其中肾移植7例,肝移植8例,收集移植前后标本;脓毒血症组4例;炎症组10例,其中肺炎4例,慢性阻塞性肺病4例,急性弥漫性腹膜炎1例,肝脓肿1例;标本采集及分析方法同正常人组。3.分析CD4+CD25+CD127LowTreg细胞在健康人的百分率,建立本实验室参考范围,并与各疾病组比较,分析原发性肝癌治疗前后、肝肾器官移植前后、脓毒血症治疗过程中、炎症组的CD4+CD25+CD127LowTreg细胞表达的变化及特点;4.同时采用ELISA方法检测35例病人(肝癌治疗前后20例,器官移植前后15例)标本血清中TGF-β1、IL-10的浓度,分析这两种细胞因子浓度水平在原发性肝癌治疗前后,移植前后的差异,分析两种细胞因子浓度与CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率的关系。结果:1.正常人组:CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率在男女性别间无显著性差异(P>0.05);在≤49岁不同年龄段三组之间无显著性差异(P均>0.05);≥50岁的两组无显著性差异(P>0.05);将≤49岁的三组与≥50岁的两组分别进行两两分析,CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率均存在显著性差异(P均<0.05);2.疾病组(原发性肝癌组、移植组、脓毒血症组、炎症组):原发性肝癌的TNM分期无显著性差异(P>0.05); CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率在≤49岁与≥50岁原发性肝癌治疗前显著高于健康对照组(P<0.05),在治疗一个月后CD4+CD25+CD127LowTreg细胞显著下降,治疗前后存在显著性差异(P<0.05);≤49岁与≥50岁移植病人的CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率显著高于健康对照组(P<0.05),肝肾移植后CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率下降为O。脓毒血症的病人CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率显著高于健康对照组(P<0.05),病情好转的病人CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率呈下降趋势;炎症组CD4+CD25+CD127IowTreg细胞为:(3.87±0.64)%,正常人:(4.69±1.27)%,炎症组低于健康人,存在显著性差异(P<0.05);3.原发性肝癌治疗前后,器官移植前CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率与TGF-β1、IL-10的浓度呈正相关(P均<0.05)。TGF-β1、IL-10的浓度在原发性肝癌治疗前后存在显著性差异(P<0.05),移植后低于移植前,无显著性差异(P>0.05)。结论:1. CD4+CD25+CD127LowTreg细胞(Treg)应用于临床时可以忽略性别;在临床应用时需根据≤49岁与≥50岁两年龄段建立不同的参考范围;本研究正常人参考范围确定为≤49岁为(3.30±1.45)%,≥50岁为(4.69±1.27)%;本研究所建立的CD4+CD25+CD127LowTreg细胞参考值范围符合本院健康体检人群特点,该指标可作为本实验室应用临床疾病检测及判断预后的依据;2.原发性肝癌患者外周血中CD4+CD25+CD127LowTreg细胞明显高于对照组,表明CD4+CD25+CD127LowTreg细胞与原发性肝癌患者的免疫功能调节紊乱有关;CD4+CD25+CD127LowTreg细胞的表达与肿瘤的发生和发展有关,在原发性肝癌免疫中起负调节作用;3.移植后应用大量免疫抑制剂可能引起CD4+CD25+CD127LowTreg细胞百分率下降为0;4.脓毒血症中CD4+CD25+CD127LowTreg细胞明显高于健康人,可能参与创伤脓毒症中的抗炎反应;5. TGF-β1、IL-10与CD4+CD25+CD127LowTreg细胞可能在肝癌和器官移植发挥重要的作用。
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