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BAK1是植物中重要的一类激酶受体。拟南芥中的研究表明:BAK1介导植物油菜素内酯信号转导、先天性免疫反应以及病原菌致毒蛋白对植物的毒性。苹果中的MdBAK1s与拟南芥中的BAK1具有很高的相似性,而目前国内外有关BAK1在苹果抵抗重要病害中的作用及其在生长发育中的作用研究很少,为此,本研究中,我们克隆了苹果中BAK1的2个同源基因,分别命名为:MdBAK1-1、MdBAK1-2,并对其进行氨基酸序列分析。分别对愈伤组织超表达后生长量的变化,对BR处理的影响,抗病性及抑制表达后对MAPK的信号响应等问题展开了相关研究,这将为进一步研究MdBAK1s在苹果生长发育以及抗病中的作用奠定基础。主要研究结果如下:1.以嘎啦组培苗为材料克隆获得苹果中BAK1的两个同源基因,分别命名为:MdBAK1-1、MdBAK1-2,氨基酸序列分析表明:MdBAK1-1、MdBAK1-2与拟南芥BAK1的序列高度保守,相似度分别为83%、84%,其中胞内激酶区域的保守性更高,均为90%。并且都具有信号肽区域、亮氨酸拉链区域、5个亮氨酸富含区域、脯氨酸富含区、跨膜区以及胞内激酶区。2.获得了稳定超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与转基因苹果株系,并初步观察其表型特征,发现转基因苹果植株长势较弱,部分叶片会随着生长发黄。3.应用RNA干扰的方法抑制苹果中MdBAK1s基因的表达,并获得MdBAK1s表达受抑制的转基因愈伤组织,初步观察其表型特征,发现表达受抑制的转基因愈伤组织颜色与对照相比较浅。4.研究了超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织在不同时期生长量的差异,结果表明生长15 d后超表达MdBAK1-1的转基因苹果愈伤组织的生长量明显高于对照,是对照生长量的2.3倍。5.研究了在不同浓度BR处理下超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织生长量的差异,结果表明当BR浓度为1.0 nmol/L时可促进苹果愈伤的生长,随着BR浓度的不断增加会抑制苹果愈伤的生长,但当BR浓度为1000 nmol/L时,超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织的生长量比普通愈伤明显减少。6.研究了超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织对轮纹病菌的抗性,结果表明超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织更易感病。7.研究了MdBAK1s表达受抑制的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织在flg22处理下响应flg22信号的指示性蛋白MAPK6的表达差异,结果表明MdBAK1s表达受抑制后,MAPK6的表达在本底水平上与对照相比变弱。