目的：妊娠期高血压疾病是一种常见的危及母儿健康的产科并发症，它是一种妊娠期特有的全身性疾病，发病率约为5-10%。子痫前期是妊娠期高血压疾病分类中一种严重的并发症，其病理生理基础是全身小动脉痉挛。子痫前期的发病机制及进展过程目前是产科学界的一大难题，目前普遍公认的学说为胎盘浅着床、滋养细胞缺血、免疫失衡以及血管内皮细胞的损伤等。　　活化的Cdc42结合激酶（ Activated Cdc42 associated kinase），又称ACK1或TNK2，是一种非受体型酪氨酸激酶，在调控细胞的细胞骨架、分裂周期、细胞运动和增殖等不同方面有着重要作用，同时，与不同信号通路之间存在紧密的关系。目前关于ACK1的研究主要集中在与肿瘤的恶性程度关系上。目前国内外尚未见到有关ACK1在人类胎盘发育过程中起到的作用的研究。故本课题研究目的在于：1.首先检测ACK1在早孕期和晚孕期胎盘（后者包括正常组和PE组）中的表达及定位情况；2.借助于HUVECs以及HTR8/Svneo细胞株对于ACK1的表达情况进行测定，并检测其对上述两种细胞的生物学功能的调控；3.对细胞给予缺氧/复氧（H/R）处理后，模拟PE初期的氧化应激损伤，探讨ACK1基因怎样通过PI3K/Akt通路对人脐静脉内皮细胞以及滋养细胞的功能进行调控，在这个基础上，分析其引起子痫前期发病的基本作用机制。　　实验方法：1.首先，我们使用IHC检测在人类晚孕期（N组和PE组）、早孕期胎盘（绒毛和蜕膜）中ACK1的定位和表达情况。2.采用WB和qRT-PCR研究N组和PE组胎盘组织中ACK1的表达及差异情况。3.使用慢病毒将ACK1 shRNA转染HTR8/Svneo和HUVECs，干扰 HTR8/Svneo、HUVECs细胞中 ACK1蛋白量的表达，并采用WB、qRT-PCR以及IF判定是否干扰成功，同时，对于干扰效率进行检验。4.使用细胞迁移以及侵袭实验分析检测HTR8/SVneo细胞生物学功能由于下调ACK1而受到的影响。5.使用管腔成型实验以及细胞迁移实验测定HUVECs细胞生物学功能由于下调ACK1而受到的影响。6.使用WB检测TIMPs（TIMP1以及TIMP2）与MMPs（MMP2以及MMP9）的蛋白表达由于下调ACK1的表达而受到的影响。8.使用H/R模型模拟子痫前期滋养细胞氧化应激损伤（ oxidative stress， OS），检测HTR8/Svneo和HUVECs受到H/R损伤后生物学功能的改变，以及H/R损伤对ACK1表达的调控。9.当H/R损伤存在时，通过对ACK1进行敲降和阻断其相关PI3K/Akt通路后HTR8/Svneo以及HUVECs生物学功能在H/R处理的调控情况，探讨ACK1基因对HTR8/Svneo以及HUVECs的生物学功能调控，在此基础上分析在子痫前期发病当中的机制和作用。　　研究分析结果：1. IHC的结果显示，ACK1在人类早孕期绒毛及蜕膜中存在表达，其基本定位细胞滋养细胞和合体滋养细胞；在蜕膜中，ACK1蛋白基本上在蜕膜细胞以及EVTs当中表达。在人类晚期足月产胎盘和子痫前期胎盘中也有表达，但其在后者的表达明显低于前者。2.在对HTR8/Svneo和 HUVECs转染ACK1 shRNA进行ACK1蛋白的下调后，两种细胞的生物学功能均受到影响，但两者的增殖和凋亡功能无明显改变。3.转染 ACK1 shRNA后， WB结果显示HTR8/Svneo细胞和HUVECs中MMP2和MMP9的表达均下降，而TIMP1/2的表达上升。4.在 HTR8/Svneo细胞和 HUVECs中，当ACK1的表达下调后，前者的迁移和侵袭能力明显下降，而后者的迁移和管腔形成能力较正常组下调；5.当细胞处于缺氧/复氧状态时， HUVECs以及HTR8/Svneo细胞的生物学功能减弱，同时，ACK1蛋白的表达减低。同时，给予H/R处理后，可下调两种细胞细胞中Akt的磷酸化活化水平，同时，下游因子表达发生相应的改变。　　实验结论：第一，ACK1基因调控妊娠期血管内皮细胞和滋养细胞的生物学功能。第二，在ACK1的表达下调的情况下，能够使得滋养细胞的迁移以及侵袭能力受到抑制，内皮细胞管腔形成与迁移等生物学功能降低。第三，ACK1基因通过调控Akt磷酸化来调控滋养细胞及内皮细胞的生物学功能，并且受氧化应激的影响，但其不影响PI3K的表达，其表达的下调可能对子痫前期的发生发展过程具有促进作用。