兔膝关节创伤性滑膜炎IL-1β和TNF-α表达与中药干预研究

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目的:通过兔膝关节创伤性滑膜炎动物模型实验的研究,①观测炎性细胞因子IL-1β和TNF-α在本病病理过程中的表达水平(含量),揭示可能的发病机制;②观测中药“膝痹蠲汤”对膝关节创伤性滑膜炎干预的疗效。方法:大白兔12只,雄性,3~4月龄,体重2.2~2.8kg,随机分为:模型组(肢)和中药组,其中模型组动物的正常肢设为对照组(肢),共18个关节。动物造模方法如下:固定大白兔;用8%的硫化钠褪去关节周围的毛,露出皮肤;用3%戊巴比妥钠按1ml/kg进行麻醉;用针灸针垂直刺入兔右后肢股四头肌中点和腓肠肌中点;连接针灸治疗仪,通电,连续波波形,频率50Hz(固定),强度6.0mv,使其膝关节重复地被动进行单—屈伸动作造成膝关节滑膜的损伤,每天1次,每次90min,连续10天,建立动物模型。在造模的第1天起,中药组开始灌胃给药,每1ml药液含生药量相当1g,每次灌药量药为4.7ml/kg,每日1次,治疗10天。模型组给以等量0.9%生理盐水。每天测量膝关节的周径并记录在册。在造模后的第11天,用空气栓塞法将兔子处死,切开膝关节囊,经大体观察记录后,用1ml生理盐水灌洗关节腔,收集关节液,用肉眼观察其色质情况记录后置于已硅化试管中,离心(4℃,1800r,10min),收集上清液-70℃冷藏保存待用。结果:①模型组与对照组比较:模型组兔膝关节明显肿胀、滑膜明显增厚;模型组IL-1β(9.22±2.30pg/ml)与对照组(5.40±0.40pg/ml)比较有显著性差异(P<0.05);模型组TNF-α(170.76±38.00pg/ml)与对照组(55.45±9.39pg/ml)比较有非常显著性差异(P<0.01)。②中药组与模型组比较:中药组兔膝关节只轻微肿胀、滑膜只轻微增厚;中药组IL-1β(6.54±0.63pg/ml)和TNF-α(92.20±28.29pg/ml)与模型组IL-1β(9.22±2.30pg/ml)和TNF-α(170.76±38.00pg/ml)比较,两者均有显著性差异(P<0.05)。结论:①膝关节创伤性滑膜炎的病理过程与促炎细胞因子IL-1β和TNF-α的表达水平(含量)密切相关。②中药“膝痹蠲汤”能有效抑制促炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的表达,在分子水平上揭示了中药治疗膝关节创伤性滑膜炎的疗效。
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