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背景子宫内膜异位症(Endometrosis, EMs)是指有活力的子宫内膜组织(腺体和间质)在子宫腔及子宫肌层以外部分生长,引起症状,是育龄妇女的一种常见病,其患病率约10%,有逐年上升趋势,主要引起不孕、痛经、慢性盆腔痛等症状,严重影响患者生活质量。自1921年Sampson教授首次描述该病以来,至今其病因仍然不是很清楚。近年来EMs与细胞凋亡的关系日益受到重视,细胞凋亡通过消减分泌晚期和月经期功能层失活细胞从而维持子宫内膜月经周期细胞的稳态。越来越多研究表明,在位内膜细胞和异位内膜细胞自发性凋亡的下降可能促进了EMs的发生和发展。腹腔镜手术比开腹手术具有创伤小、腹部疤痕小,术后恢复快,粘连轻,住院时间短等优点,是EMs诊断和治疗的首选方式。但是EMs患者腹腔镜手术术后复发问题一直困扰着妇产科医生,同时也吸引了越来越多学者的关注。迄今国内尚未见腹腔镜CO2气腹本身对EMs腹腔镜手术术后复发的影响及病理生理改变的报道。目的本课题结合细胞凋亡在EMs发生、发展中的作用和CO2气腹引起肿瘤转移的最新进展,通过构建SCID小鼠内异症和气腹模型,旨在探索CO2气体是否抑制了异位子宫内膜细胞的凋亡从而影响子宫内膜异位症患者腹腔镜手术术后复发和转移。材料和方法选择浙江大学医学院附属妇产科医院患子宫肌瘤行子宫切除患者的增生期子宫内膜,双侧腹壁缝合法构建SCID鼠子宫内膜异位症模型(n=60),然后构建SCID鼠CO2气腹模型(n=60),压力维持在5mmHg,时间分别为60min和120min,实验设置对照组。最后用Tunel法检测SCID鼠异位子宫内膜细胞的凋亡指数。所有实验数据用SPSS16.0统计软件包进行处理。计量数据结果由均值±标准差(X±S)表示；组间结果比较用方差分析,配对t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果1.SCID鼠子宫内膜异位症模型总成模率61.67%(37/60)。内异囊肿直径0.2cm～1.0cm不等,外观呈透明状或新鲜亮白色,内有囊液,囊壁表面覆盖有毛细血管,腹腔少量粘连。HE染色证实为子宫内膜组织,有腺上皮和间质细胞。2.SCID鼠CO2气腹模型成功率86.49%(32/37)。3.细胞凋亡检测结果(1)实验组和对照组均可见到明显的凋亡细胞(腺上皮细胞和间质细胞),凋亡细胞荧光显微镜下可见到其染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。苏木素复染后,光镜下腺上皮和间质凋亡细胞被染成深棕色。(2)实验组和对照组中腺上皮细胞随时间延长凋亡指数呈下降趋势,并且气腹时间越长凋亡指数下降越明显,其中F组(120min,2个月)与B组(免气腹,2个月)相比差异有显著意义(P<0.05)、F组(120min,2个月)与D组(60min,2个月)相比差异有显著意义(P<0.05),F组(120min,2个月)与E组(120min,1个月)相比差异有统计意义(P<0.05),其他各组间差异无显著意义(P>0.05)。(3)实验组和对照组间质细胞与同组腺上皮细胞相比凋亡指数略低,但差异无显著意义(P>0.05)。与免气腹组相比气腹各组间质细胞凋亡指数均呈下降趋势,但差异无显著意义(P>0.05),并且充气时间越长凋亡指数下降更明显,但差异无显著意义(P>0.05)。结论1.腹壁缝合法构建SCID鼠子宫内膜异位症动物模型,成模率较高,观察时限长、定位准确、易于观察、重复性强是一种理想的子宫内膜异位症动物模型。2.自制气腹装置构建SCID鼠CO2气腹模型,成功率高,较好的模拟了腹腔镜手术过程中CO2气腹状态,可以广泛在实验中使用。3.CO2气体对SCID鼠异位子宫内膜细胞的凋亡存在负调控作用,提示腹腔镜手术过程应用的CO2气体可能对EMs患者腹腔镜手术术后复发有一定的促进作用。