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目的建立叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide, EMA)与荧光定量PCR(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,目结合检测公共场所气溶胶中存活嗜肺军团菌的方法。方法在实验室用培养的嗜肺军团菌进行实验,得到EMA处理的最适条件,即在不影响活菌PCR信号的前提下,尽可能的抑制死菌的PCR信号；在实验室采集嗜肺军团菌气溶胶模拟样品,设EMA处理组和对照组,验证其检测活菌的效果；最后,将本方法在公共场所进行现场应用实验。结果EMA终浓度在2.5μg/ml、4-C孵育5min、光照5min的处理,可以在不影响活菌的情况下使死菌qPCR的信号降低2lg copies/ml左右,即可以抑制99%的死菌的PCR扩增。杂菌的存在不影响EMA-qPCR对存活嗜肺军团菌的检出。当死菌和活菌的比例不超过1000：1时,EMA-qPCR可以实现对存活嗜肺军团菌的定量检测。公共场所气溶胶样品EMA处理组嗜肺军团菌的阳性率35%(21/60),对照组57.5%(23/40)。在来自同一采样点的11对配对样品中,有1对样品EMA处理结果与对照组结果相等,5对样品的EMA处理组的qPCR结果低于对照组,qPCR信号平均降低0.58lg copies/ml,其余样品EMA处理组结果略高。结论EMA-qPCR可以用于公共场所气溶胶中存活嗜肺军团菌的快速定量检测,检测结果不受死亡的嗜肺军团菌、杂菌和气溶胶样品中其他成分的影响。