鸭沙门氏菌弱毒株的选育及其生物学特性研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JJ415722591
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究试图选育一株鸭源沙门氏菌弱毒株作为防控鸭沙门氏菌病的候选疫苗。从川渝地区种鸭场分离鉴定的沙门氏菌中筛选出一株流行率高、毒力较强的沙门氏菌作为原始菌株,对其进行紫外一亚硝基胍复合诱变,通过对雏鸭半数致死量的测定筛选出一株毒力减弱的诱变菌株,并对其生物学特性进行研究。结果如下:1.原始菌株筛选结果:共筛选出30株玻板凝集反应最明显的沙门氏菌,按菌体抗原分,07占16株(第一相鞭毛抗原皆为H1,v),O8占8株,04占6株,从07中选出毒力较强的一株作为原始菌株,其血清型为6,7:1,V:enx,即波恩沙门氏菌。2.紫外、亚硝基胍各自最佳诱变条件筛选结果:原始菌株菌悬液(1×108 CFU/ml)经波长为254 nm的紫外线在距离为20 cm的垂直高度下搅拌照射15s与在加入亚硝基胍使其最终浓度达0.5 mg/ml于37℃、100 r/min的摇床中作用30 min两种处理,均可使原始菌死亡率达80~90%,以此作为各自最佳诱变剂量进行复合诱变。3.诱变菌株毒力变化:原始菌株对一周龄雏鸭的LDso为7.4x 107,而诱变菌株对一周龄雏鸭的LDso为3.9×108,是原始菌株的5.2倍,即诱变菌株的毒力下降至原始菌株的1/5。4.诱变菌株的生物学特性:诱变菌株的血清型与原始菌株一致;通过体外培养35代,其菌落和镜下形态保持恒定,说明诱变菌株可以稳定遗传,虽然体外培养35代后诱变株毒力略有下降,但变化在95%可信区间内,即诱变菌株体外传代其毒力稳定;生化试验结果基本与原菌株一致。两者差异在于:诱变菌株在平板上形成的菌落比原始菌株形成的菌落要小,且鞭毛在固体培养基上不能表达,而在液体培养基中侧可诱导表达,而原始菌株不管在固体还是液体培养基上都能表达;通过提取原始菌株与诱变菌株的基因组并利用特异性引物对其I相鞭毛基因fliC进行PCR扩增,两者均能扩增出相同的条带,鞭毛表达异常可能与I相鞭毛的调控基因发生突变有关;诱变菌株通过口服和肌注免疫鸭只,二免过后均能检出高滴度的中和抗体,肌注组的抗体效价明显比口服组的要高,而口服高剂量组要比口服低剂量组效价要高,表明诱变株俱有良好的免疫原性,如免疫途径和剂量恰当,可诱导机体产生高滴度的中和抗体,通过攻毒保护试验进一步表明免疫诱变菌株后的鸭只能够有效抵抗相同血清型的沙门氏菌野毒株感染。
其他文献
长沙正圆动力配件厂铸造车间用于皮带运输机和斗式提升机上的普通型轴承座,因密封不良往往使轴承提前损坏。为解决此问题,这两种设备主动轮的轴承座改用一种特殊的密封方式,
农村小学由于诸多因素的影响,造成语文课堂教学出现低效的现象,农村小学语文教学水平还比较低下。笔者在乡村小学教学工作中,对农村学校语文教学的现状进行了思考,在此基础上提出
教学目标:rn1、理解赫尔墨斯、蚊子的形象.rn2、解读两则寓言故事的寓意.rn教学过程rn一、旧知检测rn1、什么叫寓言?寓言体裁有何特点?rn寓言式以劝喻或讽刺性的故事寄寓意味
23米~3挖掘机上最关键的部件之一是斗齿。这种铸钢件由于使用条件恶劣,要求具有强而韧、硬而坚的非常好的综合机械性能。因为硬度太高,则韧性太差,容易断齿,若强度太低则刚
素质教育的实施要求学生不仅要掌握知识,更重要的是要学会用所学的知识获得知识并创新知识.我们的数学教学实际并没有摆脱“应试战”,教师的精力主要放在让学生机械练习上.上
绘本凭借绚丽的色彩、优美的画面、神奇的想象、简洁的文字、有趣的故事,深受幼儿的喜爱。且很多绘本故事传递着友爱、诚信、勇敢、坚强、善良、宽容、自尊等人类基本的美德,是
商务部网站3月1日发布消息称,根据世界贸易组织秘书处初步统计数据,2013年中国以进出口总值4.16万亿美元的“成绩单”超过美国,成为世界第一货物贸易大国。美国彭博新闻社感
分层教学法的运用是现代教育思想的精华,在初中数学教学过程中,越来越多的教师开始认识到分层教学法的重要性.在实际教学的过程中,也有越来越多的教师开始尝试在实际教学的过
数学是一门逻辑性、抽象性较强的学科,小学生的思维能力、理解能力还不成熟,他们对直观的、具体的事物感兴趣。因此,在小学数学教学中,教师要善于从学生的生活经验和已有知识出发
“数学枯燥、数学难学”是许多学生的共同的心声.然而成功攻破数学难题又是学生公认的最大快乐.拿到一个题目如何快速敏捷地想出正确的解题思路,找到题感?特别要添加辅助线的