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本研究试图选育一株鸭源沙门氏菌弱毒株作为防控鸭沙门氏菌病的候选疫苗。从川渝地区种鸭场分离鉴定的沙门氏菌中筛选出一株流行率高、毒力较强的沙门氏菌作为原始菌株,对其进行紫外一亚硝基胍复合诱变,通过对雏鸭半数致死量的测定筛选出一株毒力减弱的诱变菌株,并对其生物学特性进行研究。结果如下:1.原始菌株筛选结果:共筛选出30株玻板凝集反应最明显的沙门氏菌,按菌体抗原分,07占16株(第一相鞭毛抗原皆为H1,v),O8占8株,04占6株,从07中选出毒力较强的一株作为原始菌株,其血清型为6,7:1,V:enx,即波恩沙门氏菌。2.紫外、亚硝基胍各自最佳诱变条件筛选结果:原始菌株菌悬液(1×108 CFU/ml)经波长为254 nm的紫外线在距离为20 cm的垂直高度下搅拌照射15s与在加入亚硝基胍使其最终浓度达0.5 mg/ml于37℃、100 r/min的摇床中作用30 min两种处理,均可使原始菌死亡率达80~90%,以此作为各自最佳诱变剂量进行复合诱变。3.诱变菌株毒力变化:原始菌株对一周龄雏鸭的LDso为7.4x 107,而诱变菌株对一周龄雏鸭的LDso为3.9×108,是原始菌株的5.2倍,即诱变菌株的毒力下降至原始菌株的1/5。4.诱变菌株的生物学特性:诱变菌株的血清型与原始菌株一致;通过体外培养35代,其菌落和镜下形态保持恒定,说明诱变菌株可以稳定遗传,虽然体外培养35代后诱变株毒力略有下降,但变化在95%可信区间内,即诱变菌株体外传代其毒力稳定;生化试验结果基本与原菌株一致。两者差异在于:诱变菌株在平板上形成的菌落比原始菌株形成的菌落要小,且鞭毛在固体培养基上不能表达,而在液体培养基中侧可诱导表达,而原始菌株不管在固体还是液体培养基上都能表达;通过提取原始菌株与诱变菌株的基因组并利用特异性引物对其I相鞭毛基因fliC进行PCR扩增,两者均能扩增出相同的条带,鞭毛表达异常可能与I相鞭毛的调控基因发生突变有关;诱变菌株通过口服和肌注免疫鸭只,二免过后均能检出高滴度的中和抗体,肌注组的抗体效价明显比口服组的要高,而口服高剂量组要比口服低剂量组效价要高,表明诱变株俱有良好的免疫原性,如免疫途径和剂量恰当,可诱导机体产生高滴度的中和抗体,通过攻毒保护试验进一步表明免疫诱变菌株后的鸭只能够有效抵抗相同血清型的沙门氏菌野毒株感染。