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现在全球资源和能源日益枯竭，世界各国都在谋求有效地开发和利用生物质资源，纤维素则是世界上分布十分丰富又可再生的生物质，但是其中大部分没有被充分利用，很多纤维素被当成垃圾丢弃。这种处理方式造成了环境污染和经济损失，违背了可持续发展的理念。目前纤维素酶由于其热稳定性、酶活力和pH稳定性太低而达不到工业生产相关标准，很难满足需求。嗜热真菌所产生的纤维素酶热稳定性、酶活力和pH稳定性在高温条件下仍然较高。嗜热子囊菌光孢变种（Thermoascus aurantiacus var.levisporus）广泛分布于土壤之中。人们已经从中分离出很多嗜热酶，并且其产生的纤维素酶经证明具有极大的应用和研究价值。 本研究分别对已经从嗜热子囊菌光孢变种（T.aurantiacus var.levisporus）分离到的eg1基因（GenBank登录号为AY847014），构建酵母表达载体并转化酵母进行大量发酵，得到工程菌命名为GpN25，并且其热稳定性良好。工程菌GpN25其分子量为33kDa，最适pH和温度分别为5.0和55℃，在90℃高温保存30min后仍然具有50％的酶活，在pH3.0-5.0的条件下其酶活力仍然保持稳定。为了提高酶活力，本课题中以eg1基因为出发点，采用易错PCR技术构建了数量较大的突变体库，通过高通量筛选的方法最终获得两株酶活力分别提高2.19倍和1.88倍的突变体，分别将其命名为NT0252和NT0253。通过突变体与原始菌的序列比较，发现NT0252第52位氨基酸由F变为E，即由苯丙氨酸突变为谷氨酸;第91位氨基酸由D突变为N，即由天冬氨酸突变为天冬酰胺;第170位氨基酸由W突变为H，即由色氨酸突变为组氨酸。发现NT0253第14位氨基酸由A突变为G，即由丙氨酸突变为甘氨酸;第198位氨基酸由H突变为M，即由组氨酸突变为蛋氨酸;第224位氨基酸由S突变为C，即由丝氨酸突变为半胱氨酸。经过硫酸铵沉淀、透析、DEAE阴离子层析交换柱等步骤纯化突变体蛋白，并测定酶学性质，与原始菌比较，结果表明:突变体NT0252和NT0253的最适温度分别是60℃和55℃，而原始菌的最适温度为50℃，表明突变体NT0252和NT0253较原始菌更能耐高温;最适pH由4.0分别变为了5.0和6.0，表明突变体NT0252和NT0253能在较宽的pH范围内表现水解活性。