论文部分内容阅读
目的：肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,近年来其发生率和死亡率均呈上升趋势,目前尽管采用了各种先进的诊疗措施,使肿瘤的综合治疗达到了一个新水平,但肺癌的疗效近数十年来无明显提高,五年生存率仅有10-15%。究其原因与肿瘤的侵袭和转移有着密切的联系。高迁移率族蛋白B1 (High mobility group box 1,HMGB1)是存在于真核细胞内非组蛋白染色体结合蛋白,最近研究显示HMGB1参与多种肿瘤侵袭和转移。研究发现,HMGB1可通过激活核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白与基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因的启动子结合,从而使MMP-9基因的蛋白表达增高,以发挥促进肿瘤侵袭和转移的作用。本研究采用免疫组化方法检测了955非小细胞肺癌组织中HMGB1、NF-KBp65和MMP-9蛋白的表达,并分析其与各种临床参数的关系,探讨其在非小细胞肺癌癌发生、发展和转移中的作用。方法：选取2007年7月一2009年7月在天津市胸科医院就诊的95例NSCLC患者的石蜡包埋组织标本,入选患者均经手术治疗,术前均未做过放化疗,术后均经病理证实,另外取27例癌旁正常肺组织标本作为对照组。采用免疫组织化学SP三步法,检测HMGB1、NF-KBp65和MMP-9蛋白的表达情况及其在不同临床病理参数间表达的差异。采用SPSS13.0统计学软件进行数据分析,采用X2检验及确切概率法,以P<0.05为差异有统计学意义。各指标之间的相关性采用Spearman等级相关分析。结果：1. HMGB1、NF-KBp65和MMP-9蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达情况(1) HMGB1蛋白在癌组织中肿瘤细胞、间质炎细胞的胞质和(或)胞核均可呈高表达,NF-kBp65蛋白表达于癌组织中肿瘤细胞的胞质和(或)细胞核,间质细胞基本无表达,呈淡黄至棕黄色。且伴有淋巴结转移的肿瘤细胞,其HMGB1蛋白和NF-KBp65蛋白阳性表达均高于无淋巴结转移者,具有统计学意义。(P<0.01)。(2) HMGB1蛋白高表达的46例NSCLC组织中,NF-KBp65蛋白阳性表达率为69.57%; HMGB1蛋白低表达的49例NSCLC组织中,NF-KBp65蛋白阳性表达率为20.41%。HMGB1蛋白的表达情况与NF-κBp65蛋白表达呈显著正相关(r=0.443,P<0.05)。MMP-9蛋白在NSCLC转移组中阳性表达率为60.3%,在非转移组中表达明显减弱为27.0%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。2. HMGB1、NF-κBp65和MMP-9蛋白与非小细胞肺癌临床病理特征的关系(1) HMGB1蛋白在不同组织学分型、分化程度、TNM分期患者表达差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而不同年龄、性别及肿瘤大小患者HMGB1蛋白表达率差异均无统计学意义P>0.05)。(2) NF-κBp65蛋白在不同组织学分型、分化程度、TNM分期患者表达差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而不同年龄、性别及肿瘤大小患者NF-κBp65蛋白表达率差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)MMP-9蛋白在晚期(Ⅲ期)NSCLC组织中的阳性表达率高于早中期(Ⅰ-Ⅱ期)者,且差异有统计学意义(P<0.05)；在腺鳞癌中的阳性表达率显著高于腺癌和鳞癌(P<0.01),且随着肿瘤分化程度的降低其阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05))；另外不同年龄、性别及肿瘤大小患者MMP-9蛋白表达均有差异,但无统计学意义(P>0.05)。3. HMGB1、NF-κBp65和MMP-9蛋白表达的相关性Spearman等级相关分析表明：在非小细胞肺癌组织中HMGB1蛋白的表达情况与NF-κBp65、MMP-9蛋白表达均呈显著正相关(r=-0.443和r=8.794,p<0.05), NF-κBp65表达情况与MMP-9呈明显正相关(r=0.217,P<0.05)。结论：1.HMGB1蛋白在非小细胞肺癌组织中肿瘤细胞、间质细胞均可呈高表达,并且伴有淋巴结转移的肿瘤细胞、间质细胞,其HMGB1蛋白阳性表达均高于无淋巴结转移者,具有统计学意义,提示HMGB1蛋白阳性表达与非小细胞肺癌细胞的淋巴结转移相关。2.NSCLC组织中NF-κBp65和MMP-9蛋白的表达均与组织学分型、分化程度、临床分期等呈密切相关,且两者在淋巴结转移组阳性表达率高于无淋巴结转移组,说明两者与NSCLC的发生发展及转移有关,作为重要的转录因子和基质金属蛋白酶有促进NSCLC转移的作用。3. HMGB1和NF-κBp65、MMP-9在肺癌组织中的表达呈正相关,三者的表达均与NSCLC的淋巴结转移有关。推测HMGB1可通过激活核转录因子κB (NF-KB)p65蛋白与基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因的启动子结合,从而使MMP-9基因的蛋白表达增高,以发挥促进肿瘤侵袭和转移的作用。4.联合检测HMGB1、NF-KBp65和MMP-9对判断NSCLC转移有一定的价值,可以作为监控淋巴结转移的生物学标志,有望成为预测肺癌侵袭、转移及预后的指标。