武夷山茶树种质DNA指纹图谱构建及新品种选育

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茶树(Camellia(L.)O.Kuntze)属山茶科山茶属茶亚属茶种植物,至今已有3000多年的人工栽培历史,经过几千年的人工或自然育种,形成了非常丰富的茶树种质资源。目前,在国家茶树种质资源圃已保存近4000份茶树种质,各省、区地方茶树种质资源圃也保存大量茶树种质。武夷山是福建省茶树种质资源的宝库,具有成百上千份珍贵优异茶树种质资源,然而这些种质资源还没得到系统的整理、发掘和利用,未能对茶产业发展带来应有的效应。本研究对利用ISSR分子标记技术对123份武夷山茶树种质进行聚类分析,同时构建其DNA指纹图谱;从中筛选出5份表现优异的茶树种质进行区域试验,以全面了解每份种质的特性;主要研究成果如下:1、针对茶树叶片含有较多茶多酚、茶多糖等次生代谢产物的特点,改良了茶树DNA的提取方法。建立了适合武夷山地方茶树种质的ISSR-PCR反应体系,即在20μL的体系中含 1O×PCR Buffer(含 Mg2+)2μL,Ex-Taq 酶 1U、dNTP 浓度 4mM、引物浓度 1OμM 以及40ng的DNA模板。从100条ISSR引物中筛选出12条条带清晰、多态丰富的引物,用于茶树的ISSR-PCR反应。2、用筛选出的12条ISSR引物对123份武夷山茶树种质进行PCR扩增,共扩增出167个位点,其中多态性位点有160个,多态性比率为95.8%。依据扩增结果以此建立“0-1”原始数据矩阵,并用NTSYS2.1软件进行聚类分析,建立聚类分析树状图,并分析其遗传多样性,123份茶树种质间的遗传相似系数介于0.4611-0.9222之间,平均值为0.6318。从160个多态性位点中筛选出18个多态性最丰富的位点,建立123份茶树种质的DNA指纹图谱,为武夷山茶树种质的进一步研究奠定了基础。3、通过对区试品系的形态学特征和生物学特性的观测和分析,对各个品系的特性有了初步的认识,为下一步进行新品种审定提供一定的依据。以下是各个品系的总结:农星8号,灌木型,树姿为半开张,小叶类。适应性广。叶片稍上斜状着生,叶色深绿,叶尖急尖,叶基近圆,叶身内折,叶面平,叶缘波状,叶质中,叶形长椭圆,叶脉5对,叶齿深、锐、密;芽叶浅绿色,芽叶茸毛多较少,一芽三叶长3±0.5 cm,百芽重36.5±8.2 g,一芽一叶期在3月下旬,一芽二叶期4月上旬;茶花有6瓣花瓣,质地薄,花瓣白色,花冠直径为3.4±0.4 cm,5片绿色花萼,花萼有茸毛,柱头开裂数3裂,花柱裂位中,花柱长度为1.6±0.06 cm,雌蕊高,子房有茸毛;鲜叶游离氨基酸总量为2.1±0.28%,茶多酚含量为13.3±0.27%,咖啡碱含量为3.4Π0.15%,水浸出物含量为40±0.49%,酚氨比值为6.1±1.2。农星9号,灌木型,树姿为开张,小叶类。适应性广。叶片稍上斜状着生,叶色绿色,叶尖渐尖,叶基近圆,叶身内折,叶面微隆起,叶缘平,叶质中,叶形长椭圆,叶脉6-7对,叶齿深、密;芽叶黄绿色,芽叶茸毛少,一芽三叶长4.4±0.4 cm,百芽重51.3±5.3 g;一芽一叶期在2月下旬到3月上旬,一芽二叶期在4月上旬;茶花有6瓣花瓣,质地薄,花瓣白色,花冠直径为3.6±0.06 cm,5片绿色花萼,花萼有茸毛,柱头开裂数3裂,花柱裂位高,花柱长度为1.4±0.15 cm,雌蕊高,子房有茸毛;鲜叶游离氨基酸总量为1.3±0.2%,茶多酚含量为14±1.24%,咖啡碱含量为3.5±0.2%,水浸出物含量为39.3±3.36%,酚氨比值为11.3±3。农星10号,小乔木型,树姿为半开张,小叶类。适应性广。叶片稍上斜状着生,叶色绿色,叶尖渐尖,叶基近圆,叶身内折,叶面隆起,叶缘微波,叶质中,叶形椭圆,叶脉5-6对,叶齿深、密;芽叶紫绿色,芽叶茸毛中等,一芽三叶长2.7±0.5 cm,百芽重46.6±11.3 g;一芽一叶期在3月中旬,一芽二叶期在3月下旬。茶花有7-8瓣花瓣,质地薄,花瓣淡绿色,花冠直径为3.4±0.29 cm,5片绿色花萼,花萼有茸毛,柱头开裂数3裂,花柱裂位高,花柱长度为1±0.06 cm,雌蕊高,子房有茸毛。鲜叶游离氨基酸总量为1.6±0.36%,茶多酚含量为14.4±0.52%,咖啡碱含量为4.1 ±0.52%,水浸出物含量为37.5±5.53%,酚氨比值为9.6±2.8。农星11号,灌木型,树姿为开张,小叶类。适应性广。叶片稍上斜状着生,叶色绿色,叶尖钝尖,叶基近圆,叶身内折,叶面微隆起,叶缘平,叶质中,叶形椭圆,叶脉6对,叶齿浅、密;芽叶紫绿色,芽叶茸毛少,一芽三叶长4.5±0.8 cm,百芽重56.8±7.3 g;一芽一叶期在3月下旬,一芽二叶期在3月下旬;茶花有6-7瓣花瓣,质地薄,花瓣白色,花冠直径为4.41±1.08 cm,5片绿色花萼,花萼有茸毛,柱头开裂数3裂,花柱裂位高,花柱长度为1.4±0.06 cm,雌蕊高,子房有茸毛。鲜叶游离氨基酸总量为2.3±0.07%,茶多酚含量为13.3±0.91%,咖啡碱含量为3.4±0.06%,水浸出物含量为42.7±0.83%,酚氨比值为5.8±0.6。农星12号,灌木型,树姿为半开张,小叶类。适应性广。叶片稍上斜状着生,叶色深绿,叶尖渐尖,叶基近圆,叶身内折,叶面平,叶面微隆起,叶缘微波,叶质中,叶形长椭圆,叶脉6对,叶齿深、密;芽叶紫绿色,芽叶茸毛少较少,一芽三叶长4.1±0.6 cm,百芽重42.7±4.5 g;一芽一叶期在3月中旬,一芽二叶期在3月下旬;茶花有7瓣花瓣,质地薄,花瓣淡绿色,花冠直径为3.6±0.15 cm,5片绿色花萼,花萼有茸毛,柱头开裂数3裂,花柱裂位高,花柱长度为1.4±0.06 cm,雌蕊高,子房有茸毛;鲜叶游离氨基酸总量为2.7±0.11%,茶多酚含量为13.6±0.3%,咖啡碱含量为3.8±0.07%,水浸出物含量为34.9±5.15%,酚氨比值为5±0.3。黄棪,小乔木型,树姿为半开张,小叶类。适应性广。叶片稍上斜状着生,叶色黄绿色,叶尖渐尖,叶基近圆,叶身内折,叶面微隆起,叶缘平,叶质中,叶形椭圆,叶脉6对,叶齿浅、密;芽叶黄绿色,芽叶茸毛少;一芽三叶长4.3±0.6 cm,百芽重61.2±2.8 g;一芽一叶期在3月上旬,一芽二叶期在3月中旬;茶花有6瓣花瓣,质地薄,花瓣白色,花冠直径为3.6±0.06 cm,5片绿色花萼,花萼有茸毛,柱头开裂数3裂,花柱裂位高,花柱长度为1.3±0.1 cm,雌蕊高,子房有茸毛;鲜叶游离氨基酸总量为2.2±0.1%,茶多酚含量为13.4±1.02%,咖啡碱含量为3.7±0.26%,水浸出物含量为37.2±1.9%,酚氨比值为6.1 ±0.2。
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