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少棘蜈蚣（Scolopendra subspinipes mutilans）属于唇足纲(Chilopoda)，蜈蚣目(Scolopendromorpha)，蜈蚣科(Scolopendridae)，蜈蚣属(Scolopendra)，是我国主要的药用蜈蚣，分布于湖北、江苏、浙江等地，尽管少棘蜈蚣被用于治疗肿瘤等疾病已经有数千年之久，但是针对其毒液成分及作用机制的研究却极少。 本论文中，对少棘蜈蚣毒液的成分和活性进行了一系列的研究。 首先用交流电刺激的方法收集蜈蚣毒液。通过凝胶过滤层析、反向高压液相色谱两种纯化方法从蜈蚣的毒液中分离得到6个具有离子通道活性的蜈蚣毒素。分别命名为μ-SLPTX-Ssmla，κ-SLPTX-Ssmla，κ-SLPTX-Ssm2a和κ-SLPTX-Ssm3a，ω-SLPTX-Ssml a和ω-SLPTX-Ssm2a。利用Edman降解法测定μ-SLPTX-Ssmla的成熟肽序列为ADNKFENSLRREIACGQCRDKVKCDPYFYHCG，由32个氨基酸残基组成，MALDI-TOF鉴定其分子量为3762.5Da。κ-SLPTX-Ssmla的成熟肽序列为TDDES SNKCAKTKRRENVCRVCGNRSGNDEYYSECCESDYRYHRCLDLLRN，由51个氨基酸残基组成，MALDI-TOF鉴定其分子量为6050.2Da。κ-SLPTX-Ssm2a成熟肽序列为AQNHYCKEHNCPPGKHCPKVPIVCVYGPCCF，由31个氨基酸残基组成，MALDI-TOF鉴定其分子量为3467.1Da。κ-SLPTX-Ssm3a成熟肽序列为EVIAIDGLEICSNDQLHVTIYSIFSPLFDKPKLNYYFNCSCPGSIYISDVYPKYFNDIAHIEYRCKLT，含有68个氨基酸残基，MALDI-TOF鉴定其分子量为989.07Da。ω-SLPTX-Ssmla成熟肽序列为EECPSLSGGSSNYCSKKETFTSNGNLEQTRRYCNSVAAPSTACTDLKTGGKLCEYSCNTDGCNSVAGMEPTRAVYFIAILMLA，含有83个氨基酸残基，分子量为8818.8Da。ω-SLPTX-Ssm2a成熟肽序列为EESQHDTLENVEYRLSCIPKGGECERMADTCCPGLQCLGCNPFNKENLGKCKCQ，含有54个氨基酸残基，MALDI-TOF分析其分子量为6023.8Da。 同时提取蜈蚣毒液腺RNA，构建了蜈蚣毒液腺cDNA文库，采用DNA末端快速扩增法(RACE)从中克隆得到了编码这6个蜈蚣毒素前体的cDNA序列。 通过全细胞记录(whole-cell recording)模式的膜片钳技术，对这6个蜈蚣毒素进行了离子通道生物活性的研究，检验了这6个蜈蚣毒素对大鼠背根神经节(DRG)细胞电压门控钠离子通道，钾离子通道和钙离子通道电流的影响。其中μ-SLPTX-Ssmla对河豚毒素敏感型(TTX-S)钠离子电流表现出较强的抑制效应，其半有效浓度(IC50)为9±2 nM(n=5)，对河豚毒素不敏感性(TTX-R)钠电流没有明显作用。κ-SLPTX-Ssmla和κ-SLPTX-Ssm2a对大鼠DRG细胞钾离子电流有较强的抑制作用，其半有效浓度(IC50)分别为44.2±5.7 nM(n=5)，570±126 nM（n=5）。κ-SLPTX-Ssm3a对钾电流的抑制作用稍弱。ω-SLPTX-Ssmla能增加大鼠DRG细胞钙离子电流，ω-SLPTX-Ssm2a能够抑制大鼠DRG细胞钙离子电流，其半有效浓度(IC50)为1590±279nM（n=5）。 对蜈蚣毒液分离纯化得到的6个蜈蚣毒素进行了杀虫活性的分析，其中除了ω-SLPTX-Ssmla和ω-SLPTX-Ssm2a外，其余毒素对家蝇（幼虫和成虫）、黄粉虫和蟑螂均表现出较强的致死活性，其中蜈蚣粗毒的杀虫效果要强于纯化得到的蜈蚣毒素。 综上所述，本项研究中从少棘蜈蚣中发现并分离得到了6种新型蜈蚣毒素，并对其进行了结构和功能的研究。它们有不同的化学结构，并作用多种类型的离子通道，它们展示出蜈蚣毒素在分子水平的生物多样性，并将有可能作为具有较强专一性的工具试剂应用于离子通道的研究和神经生物学研究。此外，蜈蚣毒素所表现出的高效杀虫活性，使其成为开发新型杀虫剂的候选资源库。